11456

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МЕТАБОЛИТОВ МОНООКСИДА АЗОТА (НИТРИТОВ) В СЛЮНЕ

Лабораторная работа

Химия и фармакология

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА Определение содержания метаболитов монооксида азота нитритов в слюне НитрогенIIоксид NO это свободный радикал который образуется в организме из аргинина и выполняет роль мессенджера в ряде биологических процессов. Аргинин цитрулин NO ...

Русский

2013-04-08

28.5 KB

6 чел.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Определение содержания метаболитов монооксида азота (нитритов) в слюне 

Нитроген(II)оксид (NO) - это свободный радикал, который образуется в организме из аргинина и выполняет роль мессенджера в ряде биологических процессов.

Аргинин цитрулин + NO

При метаболизме 80% NO превращается в нитриты или нитраты. Перед определением восстанавливают имеющиеся в среде нитраты до нитритов, используя омеднённый кадмиевый редуктор.

ПРИНЦИП МЕТОДА. Нитриты взаимодействуют с реактивом Грисса (a-нафтиламин и сульфаниловая кислота в соотношении 5:1) при температуре 30ºС с образованием соединений розового цвета. Окрашивание, интенсивность которого определяется на ФЭК, прямо пропорционально концентрации нитритов в слюне. Перед определением восстанавливают имеющиеся в среде нитраты до нитритов, используя омеднённый кадмиевый редуктор.

Реактивы: 1) реактив Грисса (1 % сульфаниламид и 0,1 % нафтилендиамин, разведенные в 12 % уксусной кислоте); 2) стандартный раствор нитрита Na или K.

Объект исследования: смешанная слюна, сыворотка крови.

Ход работы.

К 0,1 мл слюны (или сыворотки крови) прибавляют 0,9 мл дистиллированной воды и 1,0 мл реактива Грисса. Выдерживают в термостате на протяжении 20 мин при температуре 30ºС. Колориметрируют на ФЭК при длине волны 540 нм в кювете
0,5 см против контроля, где вместо слюны (или
сыворотки крови) берут 0,1 мл дистиллированной воды.

Расчет: Расчеты производят с использованием:
1) калибровочной пробы с известной концентрацией нитрита натрия(или калия); или
2) калибровочной кривой, построенной по известным концентрациям нитрита
Na(K) в диапазоне от 0 до 150 мкМ, результаты выражают в мкМ

И(С) = 3,34 · DD мкг в опыте, где

И(С) - концентрация продуктов оксида азота (нитритов) в слюне;

3,34 - коэффициент расчета;

DD - масса нитритов в опыте, в мкг, найденная по калибровочному графику.

Нормы: концентрация нитритов в слюне составляет 2-4 мкг/мл. (график можно построить, используя мкг/мл, тогда результат выражается также в мкг/мл).

Клинико-диагностическое значение

Физиологическая функция NO многогранна. Он является фактором релаксации сосудов и снижения артериального давления. В частности, действие нитроглицерина, виагры, нитропруссида натрия связано с образованием из них монооксида азота, который активирует гуанилатциклазу и через синтез цГМФ вызывает расслабление гладких мышц сосудов. NО принимает участие в ингибировании аггрегации тромбоцитов и фиксации лейкоцитов к эндотелию; выполняет роль медиатора ЦНС (с нарушением обмена нитроген оксида связывают возникновение болезни Альцгеймера); регулирует перистальтику кишечника, эрекцию. Монооксид азота является мощным медиатором воспаления и выделяется в ответ на действие микробов, вирусов, провоспалительных цитокинов. Глюкокортикоиды тормозят активность NO-синтазы и уменьшают синтез NO.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

38741. Научно-методическое пособие для магистров направления «Государственное и муниципальное управление» 1.32 MB
  Научнометодическое пособие подготовлено на кафедре региональной экономики и территориального управления Воронежского государственного университета. ТЕМАТИКА МАГИСТЕРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ Подготовка магистерских диссертаций осуществляется в рамках основных направлений научных исследований кафедры региональной экономики и территориального управления проводимых по заказам органов государственной власти и местного само управления организаций публичного сектора экономики региона. В их числе: ...
38743. Казачество в 21-м веке: создание нового способа жизни в депрессивных поселениях Украины 99.5 KB
  Особенно велики перспективы казачества в возрождении депрессивных поселений – продукте нашей тяжёлой социальной эпохи. Почти два десятилетия потуг возрождения казачества есть достаточным периодом для идентификации этого процесса и оценки результатов которые в основном негативные: Казачество воспринимается населением как стохастический процесс самоназначений самонаграждений и абсолютной анархии в неадекватных действиях граничащих с опереточными 14 тысяч генералов и маршалов без казаков. А непозволительное самовольное использование...
38746. ПАТОФИЗИОЛОГИЯ ВЫСШЕЙ НЕРВНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ 137.5 KB
  Причиной в развитии невроза следует считать психическую травматизацию. Так например наличие подвижных установок к меняющимся условиям среды является фактором препятствующим возникновению невроза или способствующим успешному разрешению невротического конфликта. Таким образом можно дать и такое определение невроза. Пятый метод получения невроза в эксперименте основан на перенапряжении нервной деятельности в результате нарушения сложных отношений в стаде животных.
38747. Обеспечение защиты при косвенном прикосновении при электроснабжении от источников бесперебойного питания статического типа в установках с системами заземления TN и IT с применением автоматического отключения питания 2.09 MB
  Последнее время всё большее распространение получают технологии и агрегаты, требующие бесперебойного электроснабжения. Перерыв электроснабжения ответственных потребителей может за собой опасность для жизни людей, угрозу для безопасности государства, значительный материальный ущерб, расстройство сложного технологического процесса, Для предотвращения нарушения питания таких электроприемников должно предусматриваться дополнительное питание от независимого источника питания.
38748. Экономика фирмы. МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 247.5 KB
  68 Экономика программа Экономика фирмы подготовка и защита магистерской диссертации Ижевск 2012 УДК 330:001. Рецензент: Редакция авторов В методических рекомендациях рассмотрены вопросы организации итоговой аттестации магистрантов требования к подготовке выполнению и защите магистерской диссертации. Выбор и формулировка темы магистерской диссертации. Утверждение темы магистерской диссертации.
38749. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ МАГИСТЕРСКОЙ ДИССЕРТАЦИИ ПО НАПРАВЛЕНИЮ МЕНЕДЖМЕНТ 465 KB
  Шубин МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ МАГИСТЕРСКОЙ ДИССЕРТАЦИИ ПО НАПРАВЛЕНИЮ 080200 –МЕНЕДЖМЕНТ Рекомендовано к изданию Редакционноиздательским советом института ОБНИНСК 2011 УДК 336 Методические указания по выполнению магистерской диссертации по направлению 080200 – Менеджмент Сост. Методические рекомендации предназначены для студентов очной очнозаочной и заочной форм обучения по магистерским образовательным программам направления 080200 – Менеджмент для оказания помощи при подготовке выпускной квалификационной работы –...