11456

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МЕТАБОЛИТОВ МОНООКСИДА АЗОТА (НИТРИТОВ) В СЛЮНЕ

Лабораторная работа

Химия и фармакология

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА Определение содержания метаболитов монооксида азота нитритов в слюне НитрогенIIоксид NO это свободный радикал который образуется в организме из аргинина и выполняет роль мессенджера в ряде биологических процессов. Аргинин цитрулин NO ...

Русский

2013-04-08

28.5 KB

8 чел.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Определение содержания метаболитов монооксида азота (нитритов) в слюне 

Нитроген(II)оксид (NO) - это свободный радикал, который образуется в организме из аргинина и выполняет роль мессенджера в ряде биологических процессов.

Аргинин цитрулин + NO

При метаболизме 80% NO превращается в нитриты или нитраты. Перед определением восстанавливают имеющиеся в среде нитраты до нитритов, используя омеднённый кадмиевый редуктор.

ПРИНЦИП МЕТОДА. Нитриты взаимодействуют с реактивом Грисса (a-нафтиламин и сульфаниловая кислота в соотношении 5:1) при температуре 30ºС с образованием соединений розового цвета. Окрашивание, интенсивность которого определяется на ФЭК, прямо пропорционально концентрации нитритов в слюне. Перед определением восстанавливают имеющиеся в среде нитраты до нитритов, используя омеднённый кадмиевый редуктор.

Реактивы: 1) реактив Грисса (1 % сульфаниламид и 0,1 % нафтилендиамин, разведенные в 12 % уксусной кислоте); 2) стандартный раствор нитрита Na или K.

Объект исследования: смешанная слюна, сыворотка крови.

Ход работы.

К 0,1 мл слюны (или сыворотки крови) прибавляют 0,9 мл дистиллированной воды и 1,0 мл реактива Грисса. Выдерживают в термостате на протяжении 20 мин при температуре 30ºС. Колориметрируют на ФЭК при длине волны 540 нм в кювете
0,5 см против контроля, где вместо слюны (или
сыворотки крови) берут 0,1 мл дистиллированной воды.

Расчет: Расчеты производят с использованием:
1) калибровочной пробы с известной концентрацией нитрита натрия(или калия); или
2) калибровочной кривой, построенной по известным концентрациям нитрита
Na(K) в диапазоне от 0 до 150 мкМ, результаты выражают в мкМ

И(С) = 3,34 · DD мкг в опыте, где

И(С) - концентрация продуктов оксида азота (нитритов) в слюне;

3,34 - коэффициент расчета;

DD - масса нитритов в опыте, в мкг, найденная по калибровочному графику.

Нормы: концентрация нитритов в слюне составляет 2-4 мкг/мл. (график можно построить, используя мкг/мл, тогда результат выражается также в мкг/мл).

Клинико-диагностическое значение

Физиологическая функция NO многогранна. Он является фактором релаксации сосудов и снижения артериального давления. В частности, действие нитроглицерина, виагры, нитропруссида натрия связано с образованием из них монооксида азота, который активирует гуанилатциклазу и через синтез цГМФ вызывает расслабление гладких мышц сосудов. NО принимает участие в ингибировании аггрегации тромбоцитов и фиксации лейкоцитов к эндотелию; выполняет роль медиатора ЦНС (с нарушением обмена нитроген оксида связывают возникновение болезни Альцгеймера); регулирует перистальтику кишечника, эрекцию. Монооксид азота является мощным медиатором воспаления и выделяется в ответ на действие микробов, вирусов, провоспалительных цитокинов. Глюкокортикоиды тормозят активность NO-синтазы и уменьшают синтез NO.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

68571. Нетрадиційні форми проведення педагогічних рад. Педагогічна вітальня 60.5 KB
  Що ж таке педагогічна вітальня? Це форма методичної роботи, до якої залучаються не тільки вчителі, а й батьки, учні, представники органів місцевого самоврядування та громадських організацій. Виходячи із назви даної форми роботи «вітальня», можна зазначити, що на заходах такого типу повинні...
68572. Система научно-методической работы учебного учреждения как основа построения и реализации индивидуальной траектории профессионального развития педагога 75 KB
  Система научно-методической работы учебного учреждения как основа построения и реализации индивидуальной траектории профессионального развития педагога На современном этапе организации учебно-воспитательного процесса самым важным есть личность педагога его развитие его профессионализм.
68573. Розвиток творчого потенціалу педагога в системі науково-методичної роботи школи 83 KB
  У статті розглянуто проблему формування творчого потенціалу педагога у системі науковометодичної роботи школи. У цьому зв’язку виникає проблема вивчення розвитку і використання творчого потенціалу особистості актуалізується необхідність побудови та реалізації освітнього процесу що створює...
68574. Роль контролю, оцінювання та стимулювання навчальної діяльності у підвищенні її результативності та розвитку творчої активності учнів 217 KB
  Мета: на основі узагальнення досвіду, вивчення психолого-педагогічної літератури виявити основні причини неуспішності школярів та способи вирішення даної проблеми; з’ясувати, як впливають умови уроку на створення комфортних умов для самореалізації та самовдосконалення особистості учня й забезпечення...
68575. Найбільш типові помилки у роботі вчителів та шляхи їх подолання 536.5 KB
  Недосконалість сформованої етичної компетентності фахівця призводить до того що майбутній учитель не може правильно обрати тактику своєї поведінки. Учитель дуже тихо говорить окремі слова вимовляє нечітко учням важко стежити за ходом розповіді. Готуючись до уроку кілька разів запишіть пояснення...
68576. Інтерактивні технології — шлях до формування творчої особистості учнів 132 KB
  Мета: сприяти усвідомленню необхідності прийомів інтерактивного навчання на уроках, підвищуючи мотивацію учнів до навчання; спільно працювати над формуванням навичок співпраці, обговоренням спільного вирішення проблем. Обладнання: фліп-чат, стікери, кошик із шкільними речами, ноутбук, слайди.
68577. Обдарована дитина – обдарований учитель: суб’єкт-суб’єктний діалог 87 KB
  Ведучий 1. Шановні колеги! Вітаємо вас на нашому аукціоні, який складатиметься з двох частин: презентаційної та практичної. Сьогодні він присвячений актуальній темі «Обдарована дитина – обдарований учитель: суб’єкт-суб’єктний діалог». Ведучий 2. Щоб отримати квиток на участь у купівлі цінних паперів...
68579. ВПРОВАДЖЕНЯ ЕЛЕМЕНТІВ ЕТНОПЕДАГОГІКИ У НАВЧАЛЬНО-ВИХОВНИЙ ПРОЦЕС ЛНВК ІМ. В. СТУСА 125 KB
  Обов’язковим пунктом у планах перебування іноземних учнівських делегацій є відвідання майстеркласів з українського мистецтва. Досвід проведення майстеркласів з іноземними учнями послужив поштовхом до створення фолькпроекту Духовна скарбниця.