11456

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МЕТАБОЛИТОВ МОНООКСИДА АЗОТА (НИТРИТОВ) В СЛЮНЕ

Лабораторная работа

Химия и фармакология

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА Определение содержания метаболитов монооксида азота нитритов в слюне НитрогенIIоксид NO это свободный радикал который образуется в организме из аргинина и выполняет роль мессенджера в ряде биологических процессов. Аргинин цитрулин NO ...

Русский

2013-04-08

28.5 KB

8 чел.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Определение содержания метаболитов монооксида азота (нитритов) в слюне 

Нитроген(II)оксид (NO) - это свободный радикал, который образуется в организме из аргинина и выполняет роль мессенджера в ряде биологических процессов.

Аргинин цитрулин + NO

При метаболизме 80% NO превращается в нитриты или нитраты. Перед определением восстанавливают имеющиеся в среде нитраты до нитритов, используя омеднённый кадмиевый редуктор.

ПРИНЦИП МЕТОДА. Нитриты взаимодействуют с реактивом Грисса (a-нафтиламин и сульфаниловая кислота в соотношении 5:1) при температуре 30ºС с образованием соединений розового цвета. Окрашивание, интенсивность которого определяется на ФЭК, прямо пропорционально концентрации нитритов в слюне. Перед определением восстанавливают имеющиеся в среде нитраты до нитритов, используя омеднённый кадмиевый редуктор.

Реактивы: 1) реактив Грисса (1 % сульфаниламид и 0,1 % нафтилендиамин, разведенные в 12 % уксусной кислоте); 2) стандартный раствор нитрита Na или K.

Объект исследования: смешанная слюна, сыворотка крови.

Ход работы.

К 0,1 мл слюны (или сыворотки крови) прибавляют 0,9 мл дистиллированной воды и 1,0 мл реактива Грисса. Выдерживают в термостате на протяжении 20 мин при температуре 30ºС. Колориметрируют на ФЭК при длине волны 540 нм в кювете
0,5 см против контроля, где вместо слюны (или
сыворотки крови) берут 0,1 мл дистиллированной воды.

Расчет: Расчеты производят с использованием:
1) калибровочной пробы с известной концентрацией нитрита натрия(или калия); или
2) калибровочной кривой, построенной по известным концентрациям нитрита
Na(K) в диапазоне от 0 до 150 мкМ, результаты выражают в мкМ

И(С) = 3,34 · DD мкг в опыте, где

И(С) - концентрация продуктов оксида азота (нитритов) в слюне;

3,34 - коэффициент расчета;

DD - масса нитритов в опыте, в мкг, найденная по калибровочному графику.

Нормы: концентрация нитритов в слюне составляет 2-4 мкг/мл. (график можно построить, используя мкг/мл, тогда результат выражается также в мкг/мл).

Клинико-диагностическое значение

Физиологическая функция NO многогранна. Он является фактором релаксации сосудов и снижения артериального давления. В частности, действие нитроглицерина, виагры, нитропруссида натрия связано с образованием из них монооксида азота, который активирует гуанилатциклазу и через синтез цГМФ вызывает расслабление гладких мышц сосудов. NО принимает участие в ингибировании аггрегации тромбоцитов и фиксации лейкоцитов к эндотелию; выполняет роль медиатора ЦНС (с нарушением обмена нитроген оксида связывают возникновение болезни Альцгеймера); регулирует перистальтику кишечника, эрекцию. Монооксид азота является мощным медиатором воспаления и выделяется в ответ на действие микробов, вирусов, провоспалительных цитокинов. Глюкокортикоиды тормозят активность NO-синтазы и уменьшают синтез NO.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

42883. Химическая металлизация печатных плат 1.32 MB
  И так как вытравливается только этот минимальный слой около 3 мкм то величина подтравов минимальна до 2 мкм что позволяет воспроизводить проводники малой ширины. Поэтому в методе необходимо применять фоторезист толщиной около 30 мкм. Затяжкой Тентинг метод с общей металлизацией поверхности заготовки Слои 1 2 3 4 5 18 мкм 18 мкм 18 мкм Фольга 3 мкм 6 мкм 35 мкм Общая металлизация поверхности 30 мкм 40 мкм 40 мкм 50 мкм Фоторезист 25 мкм 35 мкм 35 мкм Металлизация рисунка 15 мкм 15 мкм Металлорезист 3 мкм 18 мкм 24 мкм 53 мкм Глубина...
42884. Разработка программы для построения графика временной функции в реальном и машинном времени 439 KB
  Создание MS-DOS QuickBASIC (сокращенное обозначение – QB) в середине 80-х годов произвело настоящую революцию в мире BASIC, результатом которой было то, что впервые этот язык занял достаточно прочные позиции среди средств разработки серьезных прикладных систем. В QuickBASIC в достаточно полной мере реализованы идеи структурного и модульного программирования, возможности использования процедур и функций.
42885. Разработка обучающей программы по планированию перемещения артиллерии при заданных рубежах: готовности; начала перемещения; выхода в атаку 247.06 KB
  После запуска следует выбрать какие рубежи заданы Для примера в варианте расчета при заданном рубеже начала перемещения дана схема отображающая перемещения войск в зависимости от введенных данных.
42886. Поиск и индексация в Web. Интернет-каталоги 1004 KB
  Помимо глобального поиска в пространстве Интернет существует также проблема локального поиска, т.е. поиска в пределах одного сайта или портала. Существуют готовые решения, однако для поиска внутри сайта иногда требуется более точная настройка и свои, индивидуальные, алгоритмы, которые будут осуществлять более точный и быстрый поиск по тем данным, с которыми работает сайт. Одним из главных недостатком стандартных решений от Google или Яндекс, например, также является низкая скорость обновления информации о страницах, т.е. индексации.
42890. Дивідендна політика в банку та методи її реалізації 101.48 KB
  Дивідендна політика це сукупність заходів які здійснюються банком і спрямовані на прийняття рішень із нарахування та виплати дивідендів власникам акцій цього банку. Використання коштів на виплату дивідендів акціонерам перший із двох основних шляхів розподілу прибутку банку після оподаткування другим є спрямування коштів на інвестиції для подальшого розвитку банку що приводить до збільшення майбутніх грошових потоків. Перший підхід носить назву Теорія нарахування дивідендів за залишковим принципом . Іншими словами сума виплачених...
42891. Анализ финансового состояния ООО «Алексеевское» Горьковсвского района Омской области 170.8 KB
  Огромное значение в этом вопросе имеют такие понятия рыночной экономики как деловая активность платежеспособность и кредитоспособность предприятия порог рентабельности запас финансовой прочности запас безопасности степень риска эффект финансового рычага и др. В процессе снабженческой производственной сбытовой и финансовой деятельности происходит непрерывный процесс кругооборота капитала изменяется структура средств и источников их формирования потребность в финансовых ресурсах и как следствие финансовое состояние предприятия....