15435

Иммунобиологические препараты, используемые с диагностическими целями

Доклад

Медицина и ветеринария

Иммунобиологические препараты используемые с диагностическими целями Препараты для серологической диагностики Диагностикумы антигенные Представляют собой инактивированные нагреванием либо воздействием формалина цельные микробные клетки корпускулярные АГ...

Русский

2013-06-13

33.95 KB

25 чел.

Иммунобиологические препараты, используемые с диагностическими целями

Препараты для серологической диагностики

Диагностикумы (антигенные)

Представляют собой инактивированные нагреванием либо воздействием формалина цельные микробные клетки (корпускулярные АГ) или выделенные тем или иным способом и очищенные антигенные субстанции микробов (молекулярные АГ), сорбированные на частицах нейтрального носителя (эритроциты, латекс, целлюлоза и др.).

Используются при постановке серологических реакций (прямых либо непрямых). Предназначены для обнаружения антител к возбудителям инфекционных заболеваний в пробах сыворотки крови больных.

Брюшнотифозный ОН – диагностикум

Взвесь бактерий S. Typhi, убитых обработкой формалином. Применяется для серодиагоностики брюшного тифа в развернутой реакции агглютинации (РА) Видаля. Реакция основана на обнаружении в сыворотке крови больных людей антител-агглютининов, которые появляются в конце 1-й – начале 2-й недели заболевания. Позволяет оценивать динамику нарастания и длительность сохранения антител. Диагностическим титром реакции Видаля считается разведение сыворотки больного не ниже 1 : 200.

Сальмонеллезный О – диагностикум.

Взвесь сальмонелл, убитых нагреванием (+90оС). Применяется для ретроспективной серодиагностики сальмонеллезов в развернутой реакции агглютинации (РА) типа Видаля. Реакция основана на обнаружении в сыворотке крови больных людей антител-агглютининов к соматическому О-антигену сальмонелл, которые появляются в конце 1-й недели заболевания. Диагностическим титром реакции считается разведение сыворотки больного не ниже 1 : 200.

Диагностикум бруцеллезный

Единый бруцеллезный диагностикум представляет собой взвесь бруцелл, убитых фенолом и подкрашенных метиленовым синим (для лучшей визуализации реакции). Применяется для серодиагностики бруцеллеза в развернутой реакции агглютинации Райта и реакции агглютинации на стекле Хеддлсона.

Реакция Райта с бруцеллезным диагностикумом ставится по типу реакции Видаля. Положительные результаты отмечаются спустя 1–2 недели после начала заболевания и сохраняются у переболевших многие годы. Диагностическим считается титр антител к бруцеллам 1 : 200 и выше.

Реакция Хеддлсона (пластинчатая РА) применяется для ускоренной серодиагностики. РА ставится на стекле с неразведенной сывороткой больного и с концентрированным бруцеллезным диагностикумом. Реакция положительна при наличии агглютинации на ++ (два плюса) в дозах сыворотки 0,02–0,01 мл.

Диагностикум эритроцитарный (из шигелл Зонне, Флекснера).

Выделенный из Sh. sonnei либо Sh. flexneri с помощью водно-фенольной экстракции на холоду липополисахаридный соматический О-антиген адсорбируют на стабилизированных формалином эритроцитах барана. Применяются в реакции непрямой (пассивной) гемагглютинации – РНГА (РПГА) для ретроспективного обоснования диагноза дизентерии при стертых формах, а также для уточнения вида возбудителя. Диагностическим титром при дизентерии, вызванной шигеллами Флекснера, считают разведение исследуемой сыворотки больного не ниже 1 : 200, а шигеллами Зонне – 1 : 100.

Сывороточные препараты

Диагностические иммунные сыворотки

Диагностические иммунные сыворотки получают путем иммунизации (гипериммунизации) лабораторных животных (кроликов) взвесью убитых нагреванием или обработкой формалином микробов соответствующего вида и серологической группы либо серологического варианта. Иммунизацию могут проводить с помощью выделенных из микробов и очищенных антигенов (О, Н, К, Vi и др.). Если требуется получить антитоксическую сыворотку (антитоксин), то иммунизацию осуществляют соответствующим анатоксином.

Полученная после иммунизации животных цельная сыворотка содержит антитела ко всем антигенным субстанциям микроба и носит название «нативная» или «неадсорбированная». Для освобождения нативной сыворотки от балластных, перекрестно-реагирующих антител, а также с целью получения монорецепторных (моновалентных, моноспецифичных) сывороток проводят адсорбцию по Кастеллани.

Адсорбированная моновалентная сыворотка содержит антитела только к одному типу антигена либо к отдельной антигенной детерминанте. Адсорбированная поливалентная сыворотка содержит смесь антител к нескольким антигенам либо антигенным детерминантам.

Применяются для идентификации микроорганизмов по антигенному составу (серотипирование), определения токсигенности микроорганизмов и типа микробного токсина, выявления и идентификации вирусов. Используются в различных серологических реакциях: реакция агглютинации (РА), реакция преципитации (РП), реакция нейтрализации (РН), реакция вирусной нейтрализации (РВН), реакции связывания комплемента (РСК), реакция торможения гемагглютинации (РТГА) и др.

Агглютинирующая адсорбированная сальмонеллезная О – сыворотка

Получают путем иммунизации кроликов взвесью сальмонелл соответствующей серологической группы, убитых нагреванием. Адсорбируют по Кастеллани.

Используют при постановке реакции агглютинации на стекле с целью определения видовой и групповой принадлежности выделенной культуры сальмонелл.

Ботулиническая диагностическая сыворотка (типов А, В, Е, F)

Получают из крови лошадей, гипериммунизированных ботулиническими анатоксинами разных серологических типов. Очищают и концентрируют методом «Диаферм-3».

Моновалентные сыворотки типов А, В, Е, F используются при диагностике ботулизма, для определения серологического типа токсина в исследуемом материале (фильтрат пищевого продукта) в реакции нейтрализации на белых мышах.

Диагностикумы антительные (иммуноглобулиновые)

Представляют собой высокоспецифичные диагностические препараты, основу которых составляют выделенные из иммунных сывороток иммуноглобулины (IgG) к антигенам возбудителей инфекционных болезней. Иммуноглобулины адсорбируют на эритроцитах барана, стабилизированных глютаровым альдегидом и обработанных раствором танина (либо хлорида хрома).

Используются при постановке непрямых серологических реакций – реакция обратной непрямой гемагглютинации (РОНГА). Предназначены для обнаружения возбудителей инфекционных болезней (в т.ч. особо-опасных) либо их антигенов в патологическом материале, в сырье животного происхождения, продуктах питания, объектах внешней среды.

Диагностикум эритроцитарный антительный (иммуноглобулиновый) сибиреязвенный

Вакцинный штамм СТИ (бескапсульный авирулентный штамм сибиреязвенной бациллы) применяют для иммунизации лабораторных животных с целью получения высокоактивной иммунной сыворотки. Очищенный сибиреязвенный иммуноглобулин G адсорбируют на эритроцитах с использованием химических конъюгирующих агентов (глютаровый альдегид, танин).

Применяют при экспресс-диагностике сибирской язвы путем выявления возбудителя либо его термостабильного антигена в реакции обратной непрямой гемагглютинации (РОНГА) в патологическом материале, в сырье животного происхождения, продуктах питания, объектах внешней среды.

Комплемент сухой

Диагностический препарат представляющий собой сыворотку крови морских свинок, стабилизированную сернокислым магнием и высушенную методом лиофилизации.

Сухой комплемент предназначен для применения в качестве компонента реакции связывания комплемента (РСК), используемой в диагностике различных инфекционных болезней: сифилиса, хронической гонореи, риккетсиозов и др.

Рабочее разведение комплемента определяют в предварительном опыте – реакции гемолиза.

Препараты для аллергодиагностики

Представляют собой выделенные из микробных культур и очищенные иммунологически активные компоненты микробных клеток либо продукты микробного метаболизма. Являются гаптенами, способны инициировать гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ). Поскольку инфекционная аллергия высокоспецифична и имеет общие клеточные механизмы с формирующимся иммунитетом, использование кожных аллергических реакций с диагностическими аллергенами позволяет: подтвердить факт инфицирования обследуемого человека, оценить состояние иммунитета после инфицирования либо вакцинации.

Очищенный туберкулин

В нашей стране применяется сухой очищенный туберкулин, полученный в 1965 г. М.А. Линниковой, – туберкулин ППД-Л (PPD – очищенный белковый дериват). Представляет собой экстракт белковых фракций микобактерий. Используется для постановки кожной аллергической пробы (реакция Манту). Туберкулиновые пробы основаны на определении туберкулиновой аллергии – повышенной чувствительности организма к туберкулину, возникшей вследствие заражения микобактериями туберкулеза или иммунизации вакциной БЦЖ (BCG). Туберкулиновая аллергия является иммунологически специфичной и относится к аллергическим реакциям замедленного типа. Основные цели постановки реакции: определение инфицированности, оценка течения туберкулезного процесса, определение эффективности вакцинации и отбор контингентов для ревакцинации против туберкулеза.

Туберкулин вводят внутрикожно в средней трети предплечья в строго определенной дозировке (2 ТЕ). Учитывают реакцию через 24-72 часа по образованию гиперемии и папулы.

Бруцеллин

Применяется при постановке кожно-аллергической пробы (реакция Бюрне). Проба Бюрне определяет способность организма специфически отвечать местной реакцией кожи на внутрикожное введение бруцеллина - фильтрата бульонной культуры бруцелл. Реакция становится положительной па 3-4-й неделе от начала болезни, в дальнейшем сохраняется на протяжении длительного периода (иногда до нескольких лет) даже после полного клинического выздоровления.

На ладонной поверхности предплечья внутрикожно вводят 0,1 мл бруцеллина. При наличии аллергии уже через 6–8 часов могут появиться гиперемия кожи и болезненная отечность. Учет реакции производят через 24 часа. Реакция чувствительна и появляется не только у больных и переболевших, но и у вакцинированных людей, в связи с чем необходим обязательный учет анамнестических данных обследуемых людей.

Тулярин

Выпускают два вида тулярина: для внутрикожной пробы и накожной. При помощи шприца с тонкой иглой на предплечье внутрикожно вводят 0,1 мл тулярина. У больного туляремией через сутки в области укола можно наблюдать покраснение кожи на участке размером 3х4 см (или более), припухлость и инфильтрацию. Иногда в центре гиперемированного участка образуется некроз, возможен лимфангоит и регионарный лимфаденит.

Проба высокочувствительна и дает положительные результаты у больных, начиная с 3–5-го дня болезни, но также и у переболевших и вакцинированных, поэтому оценка реакции должна проводиться с осторожностью, с учетом анамнестических данных обследуемых людей.

Препараты для фаготипирования

Представляют собой вирусы бактерий – фаги (бактериофаги), выделенные из фаголизатов соответствующих культур бактерий. Фаголизат освобождают от балластных частиц путем ультрафильтрации и консервируют с помощью 0,01% раствора хинозола или 0,25% раствора фенола.

Используют для идентификации (фаготипирования) бактерий, выделенных от больного или из объектов окружающей среды. Добавление известного бактериофага к изучаемой культуре бактерий вызовет в процессе культивирования специфический лизис только соответствующего фагу вида и варианта бактерий. Наилучшим образом разработана фагодиагностика и фаготипирование сальмонелл, шигелл, вибрионов, патогенных стафилококков. Фаги применяют в эпидемиологической практике с целью установления источника инфекции и подтверждения пути передачи инфекционного агента.

С целью выявления (индикации) возбудителей инфекционных заболеваний в материалах от людей, в воде, пищевых продуктах используется реакция нарастания титра фага (РНТФ), основанная на способности индикаторного фага к репродукции в чувствительных бактериях. При внесении такого фага в исследуемый материал, содержащий искомый возбудитель, определяется нарастание титра фага. РНТФ применяется для выявления возбудителей дизентерии, брюшного тифа, бруцеллеза, холеры, чумы.

Диагностические бактериофаги нельзя применять с лечебно-профилактической целью (!).

Холерный бактериофаг классический жидкий

Бактериофаг возбудителя классической холеры Vibrio cholerae. Препарат входит в состав набора типовых холерных фагов, которые применяются для идентификации и типирования холерных вибрионов. Фаготипирование позволяет отдифференцировать сходные по антигенной структуре биологические варианты Vibrio cholerae и Vibrio cholerae eltor, а также подтвердить диагноз «холера» в случае выделения вибрионов, не агглютинирующихся холерной О-сывороткой (НАГ-вибрионы).

Диагностические стафилококковые фаги

Набор типоспецифических фагов для фаготипирования стафилококков. Представляют собой фильтрат фаголизатов различных фаговариантов стафилококка (№№1 – 22). Фаготипирование стафилококков является важным диагностическим тестом, позволяющим точно определить выделенный фаговый вариант стафилококка, подтвердить его патогенность, установить идентичность штаммов, выделенных из разных источников. Последнее положение особенно ценно при расследовании вспышек внутрибольничных инфекций, пищевых интоксикаций.

Учебный материал подготовил доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО УГМА, канд.мед.наук А.П.Козлов, Екатеринбург, 2011.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

76632. Великая Отечественная Война: характер, этапы, итоги 36 KB
  Война между СССР и Германией в рамках Второй Мировой войны закончившаяся победой Советского Союза над фашистами и взятием Берлина. Причины Великой Отечественной Войны После поражения в Первой Мировой войне Германия осталась в крайне тяжелом экономическом и политическом положении однако после прихода к власти Гитлера и проведения реформ страна смогла нарастить свою военную мощь и стабилизировать экономику. Основные тапы Великой Отечественной войны Начальный период войны 22 июня 1941 18 ноября 1942. Третий период войны 19431945 гг.
76633. Внешняя политика СССР 1945-1985 годах 43 KB
  Победа в Великой Отечественной войне решающая роль во Второй мировой войне существенно укрепили авторитет СССР его влияние на международной арене. СССР стал одним из создателей Организации Объединенных Наций постоянным членом Совета Безопасности. Столкновение внешнеполитических интересов СССР с одной стороны и его партнеров по антигитлеровской коалиции США Великобритания с другой в сущности было неизбежным.
76634. СССР послевоенный период 1945-1953 годах 30.5 KB
  Мир разделился на два блока один из которых возглавил СССР. Верховный Совет СССР принял план реконструкции и восстановления народного хозяйства. валовая продукция сельского хозяйства СССР составляла 60 довоенного уровня. началась разработка проекта новой Конституции СССР.
76635. СССР в 1953-1964 гг. Н.С. Хрущев 40.5 KB
  Центральным аппаратом управления народным хозяйством становились СНХ СССР ВСНХ СССР. СССР выступал с предложениями о сокращении вооружения и прекращении ядерных испытаний. Для осуществления противовеса этому союзу а также для военного сотрудничества социалистических стран и СССР в мае 1955 г . была создана Организация Варшавского Договора СССР Польша Чехословакия ГДР Венгрия Румыния Болгария Албания и смотря на консолидацию внутри социалистического лагеря наблюдались противоречия вылившиеся в антисоветские выступления...
76636. СССР в 1960-1980 гг. Л.И. Брежнев, Ю.В. Андропов, К.У. Черненко 54 KB
  Андропов 1914–-1984 – председатель КГБ СССР; К. Громыко 1909–1989 – министр иностранных дел СССР; Д. Устинов 1908–1984 – министр обороны СССР и др. Подгорный ушёл в отставку а Брежнев совместил должности Генерального секретаря ЦК КПСС и Председателя Президиума Верховного Совета СССР первый в истории СССР случай объединения высшего партийного и президентского постов.
76637. Перестройка в СССР . М.С. Горбачев 43.5 KB
  Горбачев Перестройка официальный курс развития страны провозглашенный правящей верхушкой СССР во главе с М. Предполагалось что принятие решительных мер по преодолению обозначившегося снижения темпов экономического роста отставания таких отраслей промышленности как машиностроение от мирового уровня в относительно короткие сроки позволит вывести народное хозяйство СССР на новые рубежи что в свою очередь активизирует социальную политику и приведет к заметному улучшению благосостояния граждан страны. советская экономика затрещала по швам...
76638. Россия в конце 20-в начале 21 века. Глобальные проблемы человечества 71 KB
  Первым Президентом России еще в составе СССР 12 июня 1991 г. На 5 съезде Верховного Совета России председателем этого органа власти был избран Р. С кровавой войны в России началась новая эра эра президентского правления. По итогам выборов состав Государственной думы сложился следующим образом: из 450 мест наибольшее число депутатских мандатов получили представители пропрезидентского блока Выбор России Е.
76639. История в системе социально-гуманитарных наук. Основы методологии исторической науки. Факторы самобытности российской истории 35 KB
  История наука о развитии человеческого общества во всем его многообразии. История общества представляет собой совокупность конкретных и многообразных действий и поступков отдельных людей человеческих сообществ находящихся в определенной взаимосвязи составляющих все человечество. В системе социально-гуманитарных дисциплин история может играть роль всеобщей базы которая постепенно накапливается.
76640. Восточные славяне в древности 32.5 KB
  Однако историки сходятся во мнении что реальными предшественниками русских людей были восточные славяне принадлежащие к группе индоевропейских народов. В результате разгрома сарматами славяне продвигаются на север в лесную зону ассимилируя литовско-латышские и финно-угорские племена. Главными действующими лицами в нем были германцы и славяне.