1616

Определение процента живых и мертвых спермиев

Доклад

Медицина и ветеринария

В.А. Морозов предложил использовать красители, которые окрашивают спермиев только мертвых и с колебательными движениями. Дегидрогеназная активность спермы быка определяется скоростью обесцвечивания метиленовой сини в капиллярах или в пробирках.

Русский

2013-01-06

22.16 KB

5 чел.

Определение % живых и мертвых спермиев

Определение количества мертвых спермиев. В. А. Морозов предложил использовать красители, которые окрашивают спермиев только мертвых и с колебательными движениями. Самый простой способ окраски спермы быков следующий. Исследуемая сперма должна иметь концентрацию спермиев 0, 2—0, 4 млрд/мл, при более высокой концентрации эякулят разбавляют 3%-ным раствором цитрата натрия до указанного показателя. Готовят 1 —5%-ный раствор эозина водорастворимого на 3%-ном растворе лимоннокислого натрия. На чистое обезжиренное теплое (35 ± 2 °С) предметное стекло наносят каплю спермы, добавляют 2—3 капли краски, подогретой до 30 "С, смешивают 2—4 с и делают три тонких мазка, которые высушивают. В каждом препарате подсчитывают 100— 150 спермиев, отдельно учитывая количество с окрашенными и неокрашенными головками. Определение содержания патологических форм спермиев и включений спермы у быков проводят в мазках, окрашенных азурэозином или другими красителями, где подсчитывают 100—200 спермиев и различные включения. Среди нормальных спермиев всегда находится более или менее значительное количество патологических форм. Чаше аномалии выявляются в хвостовой части спермиев, основании головки и шейки. С возрастом к моменту физиологической зрелости производителя количество аномальных спермиев уменьшается. Могут встречаться самые различные патологические формы спермиев: гигантского размера или карликовые, спермин с двумя-тремя головками, но общим хвостом, с двумя хвостами, с укороченным хвостом, его деформацией или отсутствием, с цитоплазматической капелькой, слишком большой или маленькой головкой и другие формы. Иногда встречаются спермин, лишенные головки, но способные двигаться. Большое количество патологических спермиев свидетельствует о нарушении спермиогенеза, о вредном влиянии патологически измененных секретов придаточных половых желез и мочевых путей или, наконец, указывает на нарушение правил получения спермы и ее хранения во внешней среде от выделения до исследования. В качестве конкретных причин образования уродливых форм спермиев отмечают: слабо развитые семенники; поражения семенника и придатка (гигантские и карликовые спермин); длительные промежутки между коитусами, обусловливающие старение и распад спермиев в придатке (отдельные головки, изолированные хвосты); половое истощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недостаточного кормления (спермин с цитоплазматическими капельками в области шейки, тела и хвоста — незрелые спермин). Чем ближе к головке расположена капелька, тем моложе спермий. Большое значение в образовании патологических форм спермиев придается нарушению терморегулирующей функции мошонки. Закручивание хвостов спермиев в сторону происходит при смешивании спермы с гипотоническим раствором (неправильная подготовка разбавителей, попадание воды). При микроскопическом исследовании спермы выявляются следующие включения: клетки плоского, переходного эпителия, клетки семенных канальцев (зернистые); форменные элементы крови — эритроциты и лейкоциты; гиалиновые шары, круглые или овальные, иногда слоистые и напоминающие зерна крахмала, амилоидные тельца, сильно блестящие — лецитиновые зернышки, кристаллы спермина и др. Если примесей в сперме мало, это считается нормой. Если примесей много, необходимо выявить их источник и причину. Значительное количество патологических спермиев следует безусловно расценивать как признак наступающей импотенции.

Дегидрогеназная активность спермы быка определяется скоростью обесцвечивания метиленовой сини в капиллярах или в пробирках. Первый вариант получил более широкое распространение в практике. На предметное стекло, подогретое до 30—37 °С, наносят каплю спермы и добавляют теплой пипеткой каплю 0, 01 %-ного раствора метиленовой сини, подогретого до 30 °С. Капли тщательно перемешивают и набирают смесь в теплую (30—37 °С) стеклянную трубку длиной 5—6 см с внутренним диаметром 0, 8—1 мм, чтобы высота столбика была 2—3 см. Заполненную смесью трубочку кладут горизонтально на лист белой бумаги в термостат с температурой 37 ± 0, 5 "С. Записывают время начала исследования и окончания обесцвечивания метиленовой сини. Все исследования спермы проводят при строгом соблюдении действующих стандартов и инструкций по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. В результате исследования могут быть установлены следующие недостатки: асперматизм (Азм) — отсутствие спермы; олигосперматизм (Озм) — малый объем эякулята; аспермия (А) — отсутствие в сперме спермиев; олигоспермия (О) — недостаточное число спермиев вэякуляте; некроспермия (Н) — мертвые спермин; тератоспермия (Т) — патологические спермин и др.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

85855. Разработка принципиальной электрической схемы устройства суммирования двоичных чисел с параллельным переносом 821.57 KB
  Разработать принципиальную электрическую схему устройства суммирования двоичных чисел с параллельным переносам в соответствии с заданной структурной схемой лист 1 на микросхемах схематехники КМОП. Описать принцип построения и разработать в базисе ИНЕ логическую схему четырехразрядного двоичного...
85856. Анализ влияния химического состава стали 20Л на предел прочности и определение оптимального состава стали 770.36 KB
  Проведен корреляционный и регрессионный анализы, проведено планирование и обработка результатов активного эксперимента, расчеты коэффициентов линейной модели и проверка их статистической значимости.
85858. Рассчитать и спроектировать привод 1.19 MB
  Разрабатываемый привод состоит из двигателя, одноступенчатого редуктора с цилиндрической косозубой передачей, цепной передачи, компенсирующей муфты упругой втулочно-пальцевой, соединяющей редуктор с двигателем. В проектируемом приводе вращение от электродвигателя передается ведущему валу редуктора и далее на конвейер.
85859. Аналіз впливу галузевих особливостей на фінанси суб’єктів господарювання 467.5 KB
  Галузеві особливості структури підприємства. Аналіз фінансових результатів ТОВ Рубікон з позицій впливу на фінансовий стан підприємства. Досконалість методологічної та організаційної моделі обліку та аналізу собівартості впливає на ефективність господарської діяльності промислового підприємства.
85861. Разработка проекта системы наземного телевизионного вещания на территории Алексеевского района Белгородской области 9.69 MB
  Наиболее эффективным путем обеспечения удовлетворительного качества приема являются: выбор оптимального места установки приемной антенны и типа антенной системы; применение других способов подачи телевизионных программ радиорелейные линии волоконно-оптические линии связи спутниковые...
85863. Разработка проекта системы наземного телевизионного вещания на территории посёлка «Дубовое» Белгородской области 5.36 MB
  Основной целью развития телерадиовещания до 2015 года является обеспечение населения многоканальным вещанием с гарантированным предоставлением обязательных общедоступных телевизионных каналов и радиоканалов заданного качества, что позволит государству реализовать функции по обеспечению...