66162

Ретровирусы. Вирус иммунодефицита человека

Практическая работа

Биология и генетика

Ретровирусы имеют уникальный путь передачи генетической информации. Геном ретровирусов состоит из двух идентичных молекул РНК, т.е. является диплоидным. В составе ретровирусов есть особый вирусоспецифический фермент – обратная транскриптаза или ревертаза...

Русский

2014-08-14

116 KB

24 чел.

Методические указания для студентов к практическому занятию № 13.

 Тема: Ретровирусы. Вирус иммунодефицита человека.

 Цель: Изучение лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции и СПИДа.

Модуль 3. Общая и специальная вирусология.

Содержательный модуль 14. Специальная вирусология.

Тема 13: Ретровирусы. Вирус иммунодефицита человека.

Актуальность темы: Первые ретровирусы были обнаружены в начале XX в. Эллерманном, Бангом и Раусом, установившими вирусную природу эритробластоза и саркомы кур.

Семейство Retroviridae, объединяющее около 150 видов однонитевых РНК-содержащих, обратнотранскрибирующихся вирусов.

Ретровирусы имеют уникальный путь передачи генетической информации. Геном ретровирусов состоит из двух идентичных молекул РНК, т.е. является диплоидным. В составе ретровирусов есть особый вирусоспецифический фермент – обратная транскриптаза или ревертаза, с помощью которой осуществляется процесс обратной транскрипции, т.е. на матрице геномной РНК синтезируется комплементарная однонитевая ДНК (кДНК). Комплементарная нить ДНК копируется с образованием двунитевой комплементарной ДНК, которая интегрирует в клеточный геном и в его составе транскрибируется в иРНК. Синтез белков для этих вирусов осуществляется по схеме:

геномная РНК вируса→комплементарная ДНК→транскрипция иРНК→транскрипция белка вируса.

В самостоятельное семейство они были выделены лишь в 1974 г. В латинском варианте их названия приставка retro (обратный) обозначает обратную направленность потока генетической информации (не от ДНК к РНК, а наоборот, от РНК к ДНК).

Таким образом, ретровирусы плюс-нитевые диплоидные РНК вирусы, содержащие фермент обратную транскриптазу, которая на матрице РНК вируса синтезирует минус-нить ДНК, с которой копируется плюс-нить ДНК с образованием двойной нити ДНК.

Ретровирусы имеют сферическую форму, размер 80-130 нм. Вирион имеет суперкапсид и нуклеокапсидную сердцевину, кубический тип симметрии (капсид икосаэдральный). Типичным является наличие обратной транскриптазы (РНК-зависимой ДНК-полимеразы), связанной с геномом – однонитевой плюс-РНК в виде комплекса из двух идентичных субъединиц.

Вирусы содержат протеины: группового антигена (gag), полимеразный протеин (pol) и белки оболочки(env).

Семейство ретровирусов включает 7 родов.

Характеристика ретровирусов (семейство Retroviridae)

Род

Типовой вид и некоторые представители рода

Alphretrovirus

Вирусы лейкоза, саркомы птиц, саркомы рауса кур

Betaretrovirus

Вирус рака молочных желёз мышей, эндогенный ретровирус человека, вирус обезьян Мезон-Пфайзера

Gammaretrovirus

Вирусы саркомы и лейкемии мышей, кошек, приматов

Deltaretrovirus

Вирус лейкемии крупного рогатого скота, лимфотропные вирусы Т-клеток человека (HTLV-1, -2)

Epsilonretrovirus

Вирус саркомы кожи

Spumavirinae

«Пенящие» вирусы, обезьян, бычий cинцитиальный вирус

Lentivirinae

Вирус иммунодефицита человека, вирус Мэди/Висна

Следует отметить, что патогенностью для человека обладает ограниченная группа ретровирусов:

Вирусы

Тип поражения

Т-клеточные лимфотропные вирусы человека (HTLV):

HTLV-I

Вызывает Т-клеточные лимфомы и миелопатии (тропи-ческий спастический парапарез)

HTLV-II

Прямых доказательств патогенного действия нет; выделяют при хронических лимфолейкозах.

ВИЧ-1

Вызывает ВИЧ-инфекцию

ВИЧ-2

Близок к ВИЧ-1; также способен вызывать ВИЧ-инфекцию, встречается преимущественно в Западной Африке

ВИРУС ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА

Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), или AIDS (от англ, acquired immunodeficiency Syndrome), - тяжелое заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека - ВИЧ, или HIV (от англ, human immunodeficiency virus), поражающим преимущественно иммунную систему. Болезнь характеризуется длительным течением, полиморфностью клинических проявлений, высокой летальностью, передается в естественных условиях при половых контактах, а также с кровью при медицинских манипуляциях и способна к быстрому эпидемическому распространению.

ВИЧ открыт в 1983 г. американским ученым Р. Галло и французским исследователем Л. Монтанье одновременно и независимо друг от друга. Большинство исследователей склоняются к мысли об африканском происхождении заболевания и его распространении в США через страны Карибского бассейна, т.к. ещё в начале 70-х гг. у жителей некоторых африканских стран обнаруживали AT к ВИЧ. К настоящему времени идентифицировано два вида ВИЧ. Первый превалирует при клинических формах СПИДа, первоначально обнаружен в Центральной Африке, а позднее и в других регионах. Второй преимущественно выделяют в Западной и Центральной Африке. ВИЧ-2 проявляет более низкую вирулентность. После открытия Гэлло вирус относили к лимфотропным Т-клеточным ретровирусам; но более поздние исследования выявили имеющиеся существенные отличия.

Таксономия. ВИЧ отнесен к семейству Retroviridae, подсемейству Lentivirinae.

Морфология и культивирование. ВИЧ - сравнительно просто устроенный РНК-содержащий вирус, имеет сферическую форму, размер около 100 нм. Двуслойная липидная оболочка пронизана гликопротеидными антигенами gp120 и gp41 (домены gpl60). Сердцевина вируса имеет конусовидную форму и состоит из капсидных белков р24 и р25, матриксных белков, и белков протеаз. РНК - двухспиральная, для осуществления процесса репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу или ревертазу (она же РНК-зависимая ДНК-полимераза). Вирус очень трудно культивируется в искусственных условиях, размножается только в культурах лимфоцитов, накопление невысокое.

Стадии взаимодействия ВИЧ с клеткой-мишенью:

  1.  Связывание вириона с поверхностью клетки. Резекция вируса.
  2.  Слияние мембраны вируса и клетки. Проникновение вируса.
  3.  Высвобождение нуклеотида и геномной РНК-вируса.
  4.  Синтез провирусной ДНК на матрице геномной РНК-вируса.
  5.  Интеграция генома провируса в геном клетки.
  6.  Латентный период, в течении которого ДНК-провируса интегрировано в геном.
  7.  Активация процесса транскрипции с ДНК провируса, трансляция белков вируса.
  8.  Активная репликация вируса, т.е. продукция всех компонентов вируса и формирование из них зрелых дочерних вирионов.
  9.  Высвобождение вирионов и отдельных белков ВИЧ из клетки хозяина во внешнюю среду и беспрепятственное заражение других клеток. Цитопатогенные инфекции ВИЧ.

Антигенная структура. ВИЧ имеет ряд поверхностных (gp160, gp120, gp41) и сердцевинных (р24, р18 и др.) антигенов, определяющих его серологические свойства. В настоящее время выделяют две антигенные разновидности вируса: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Основные антигены вызывают образование антител у инфицированных людей; вначале появляются антитела к gp120, gp41, затем р24, которые длительно сохраняются в крови.

ВИЧ обладает уникальной антигенной изменчивостью, которая в сотни и тысячи раз превосходит изменчивость вируса гриппа, благодаря тому, что скорость его транскрипции значительно выше, чем у других вирусов. Это затрудняет диагностику и специфическую профилактику ВИЧ-инфекции.

Факторы патогенности. ВИЧ обладает лимфотропностью благодаря тому, что на лимфоцитах Т-хелперах существуют в норме рецепторы CD-4, имеющие сродство к белку gp120 вируса. Это создает благоприятные условия для прикрепления вируса к лимфоцитам, проникновения их в клетку и последующего размножения в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоцитах последние разрушаются и погибают или снижают свою функциональную активность. Однако ВИЧ поражает не только Т4-лимфоциты, но и другие клетки (нервные, В-лимфоциты, макрофаги, клетки Лангерганса), которые имеют рецепторы типа CD-4, как у Т-лимфоцитов. Поражение иммунных и других клеток приводит к снижению защитных функций иммунной системы, развитию иммунодефицитного состояния и проявлению в результате этого вторичных заболеваний инфекционной и неинфекционной природы.

Культивирование. Культивируется ВИЧ на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека, но для этого требуется присутствие интерлейкина-2 (ИЛ-2).

Резистентность. ВИЧ сравнительно малоустойчив в окружающей среде, а также к физическим и химическим факторам. При комнатной температуре сохраняется до 4 сут; через 5-10 мин инактивируется после обработки спиртом, эфиром, гипохлоритом, быстро гибнет при действии моющих средств, губительна солнечная радиация, искусственное УФ излучение, ионизирующая радиация.. Кипячение быстро убивает вирус, прогревание до 800С обезвреживает его в течение 6-7 мин, а до 600С - в течение 30 мин.

Имеются данные, что ВИЧ теряет активность при воздействии ферментов слюны и пота. Однако вирус может длительно (до 2 недель) сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови, а в донорской крови может сохраняться годами.

Восприимчивость животных. К ВИЧ чувствителен только человек; отдельные проявления ВИЧ-инфекции можно вызывать лишь у обезьян шимпанзе, у которых, однако, симптоматика СПИДа не развивается.

Эпидемиология. ВИЧ-инфекция впервые зарегистрирована в 1980-1981 гг. в США среди гомосексуалистов, затем среди лиц, страдающих гемофилией, которым для лечения часто проводят переливания крови, а впоследствии среди наркоманов и проституток. Источником инфекции являются только больной человек и носитель ВИЧ. Заражение происходит при половом контакте и парентеральном введении ВИЧ-инфицированных материалов (кровь, сыворотка, плазма, препараты крови), а также использование нестерильных инструментов и приборов, загрязненных кровью больных (шприцы, иглы, системы для переливания крови и т. д.). Возможно внутриутробное инфицирование плода, а также инфицирование ребенка через молоко ВИЧ-инфицированной матери. При бытовых контактах и через кровососущих насекомых вирус не передается.

ВИЧ-инфекция распространена на всех континентах в подавляющем большинстве стран, особенно в Америке, Африке и Европе. Эпидемия ВИЧ-инфекции стремительно распространяется; число больных удваивается через каждые 8-10 мес и за 15 лет достигло нескольких миллионов при 20 млн носителей. ВИЧ-инфекция отнесена к кризисным инфекциям, угрожающим существованию человечества, поэтому ВОЗ разработала меры по ограничению его распространения. Принят закон по борьбе с ВИЧ-инфекцией и в России.

Вирус попадает в кровь при половых контактах (особенно извращенных) или указанных выше медицинских манипуляциях, проникает в клетки, размножается в них, выходит из клеток и распространяется по всему организму. Его можно обнаружить в крови, лимфе, слюне, слезах, сперме, отделяемом влагалища, коже и других жидкостях и клетках.

Патогенез. Проникая в кроветворное русло, ВИЧ инфицирует Т-хелперы и другие клетки на поверхности которых в норме существуют рецепторы CD4 , имеющие сродство к белку gp120 ВИЧ.

Вирус прикрепляется к Т-лимфоциту, проникает путем эндоцитоза и репродуцируется в лимфоцита. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние разрушаются и теряют свои функциональные свойства.

ВИЧ инфицирует также моноциты, макрофаги, В-лимфоциты, клетки Лангерганса, дентритные нервные клетки и другие, которые имеют рецепторы CD4 как у Т-лимфоцитов.

В результате размножения вируса в различных клетках происходит накопление его органах и тканях, и он обнаруживается в крови, лимфе, слюне, сперме, слезах, моче, поте, каловых массах, содержимом урогенитального тракта, грудном молоке, в гное при воспалительных процессах.

При ВИЧ-инфекции снижается число Т4-лимфоцитов, а также отношение Т48, нарушается функция В-лимфоцитов, снижается и нарушается продукция комплемента, интерлейкинов, интерферона, в результате чего наступает дисфункция иммунной системы и расстройство ее деятельности. Вследствие поликлональной активации В-лимфоцитов вирусом возможно повышение уровня иммуноглобулинов. В результате иммунодепрессии, подавления клеточного и гуморального звена иммунитета организм становится беззащитным против экзогенных (бактерии, вирусы, грибы, простейшие) и эндогенных (опухолевые и другие клетки) антигенов. Этот механизм лежит в основе возникновения вторичных болезней и клинических проявлений ВИЧ-инфекции.

Клиника. ВИЧ-инфекция, по акад. В. И. Покровскому с 1989 года, характеризуется несколькими стадиями:

I. Стадия инкубации.

Установлено, что инкубационный период (от момента инфицирования до первых клинических проявлений или сероконверсии) продолжается от 2—3 нед до 1—2 мес, а по некоторым данным и до 3—5 лет.

II. Стадия первичных проявлений:

А — острая лихорадочная фаза;

Б — бессимптомная фаза;

В — персистирующая генерализованная лимфаденопатия.

Однако в крови определяются ВИЧ-антитела. Эта стадия может длиться годами (10-15 лет). В этот период защитные системы организма сдерживают репродукцию возбудителя.

III. Стадия вторичных заболеваний:

А — потеря массы тела менее 10%; поверхностные грибковые, вирусные, бактериальные поражения кожи и слизистых оболочек; опоясывающий лишай; повторные фарингиты, синуситы;

Б — прогрессирующая потеря массы тела более 10%; необъяснимая диарея или лихорадка более 1 мес; волосатая лейкоплакия; туберкулез легких; повторные или стойкие бактериальные, вирусные, грибковые, протозойные поражения внутренних органов (без диссеминации) или глубокие поражения кожи и слизистых оболочек; повторный или диссеминированный опоясывающий лишай; локализованная саркома Капоши;

В — генерализованные бактериальные, вирусные, грибковые, протозойные, паразитарные заболевания; пневмоцистная пневмония; кандидоз пищевода; внелегочный и атипичный туберкулез; кахексия; диссеминированная саркома Капоши; поражения ЦНС различной этиологии.

IV. Терминальная стадия: развиваются кахексия (резкое уменьшение массы тела), адинамия, деменция (слабоумие) и другие явления при снижении всех иммунологических показателей.

Считают, что только терминальную стадию можно относить к собственно СПИДу, все предыдущие следует трактовать как ВИЧ-инфекцию.

Летальность при СПИДе достигает 100 %.

Для людей, пораженных ВИЧ-инфекцией, характерны 3 группы заболеваний – оппортунистические инфекции, опухолевые болезни и поражение ЦНС.

Средняя продолжительность жизни инфицированного человека примерно 7-15 лет.

Иммунитет. Иммунитет носит гуморальный и клеточный характер. Роль антител недостаточно выяснена.

Лабораторная диагностика. Вирусологическая и серологическая диагностика сводится к определению в жидкостях и тканях организма (сыворотка крови, лимфоциты, макрофаги, сперма, слюна, содержимое влагалища и др.) вируса или его антигенов, а также антител к ВИЧ в сыворотке крови. Вирус выделяют в культуре клеток лимфоцитов, что довольно трудно в обычных условиях. Антитела к ВИЧ определяют в основном с помощью ИФА, подтверждая положительные результаты, используя метод иммуноблоттинга.

Наличие ВИЧ в крови можно выявить в различные сроки, обычно одновременно с появлением белка р24. Растворимый р24 антиген может быть выявлен в кровотоке не ранее чем через 5-10 суток после заражения. Вирусемия достигает пика к 10-20 суткам после заражения и продолжается до появления специфических антител. В крови больного появляются вируснейтрализующие антитела против gp120 и gp41, р24. ВИЧ антитела появляются через 2-4 недели после инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ-инфекции и при СПИДе.

В настоящее время наиболее чувствительными и специфичными признаны ИФА и метод вестернблота.

Выявить ВИЧ-инфекцию, т.е. вирус, в инкубационном и раннем клиническом периоде можно при помощи ПЦР.

С помощью ИФА определяют антитела к белкам gp41, gp120, p24.

В связи с тем, что gp120 имеет структурное и антигенное сходство с рецепторами некоторых клеток человека, в организме могут появляться антитела, родственные антителам против gp120. В этом случае могут быть ложноположительные результаты ИФА. Поэтому все положительно реагирующие сыворотки исследуемых подвергаются дополнительному анализу с помощью метода иммуноблотинга или вестернблотинга. В основе этого метода лежит идентификация исследуемых антител после электрофоретического разделения их и последующего тестирования с помощью меченых антивидовых антител. Метод вестернблот позволяет обнаружить специфические антитела в сыворотке к р24, gp41 либо gp120.

Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими исследованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.

Лечение. Лечение неэффективно. Некоторые результаты дает применение азидотимидина, подавляющего репликацию вируса в клетке.

Препараты, используемые для лечения ВИЧ инфицированных пациентов, разделены согласно их действию на различные стадии репликации ВИЧ:

1. Препараты, ингибирующие обратную транскриптазу: азидотимидин, ставудин.

Лечение азидотимидином продолжает жизнь больным ВИЧ-инфекцией в среднем на 1,5-2 года. Фосфазид – отечественный препарат, более эффективен и менее токсичен, чем азидотимидин.

2. Препараты, ингибирующие протеазы: саквиновир, ритонавир и др.

Основная перспектива их терапевтического использования – совместное применение с ингибиторами обратной транскриптазы.

3. Комбинированная терапия: ингибиторами обратной транскриптазы и ингибиторами протеаз.

Профилактика. Специфическая профилактика не разработана.

В течение длительного времени предпринимаются попутки разработать вакцину против ВИЧ, однако надежной и безопасной вакцины против ВИЧ не существует. Созданы вакцины на основе методов генной инженерии. Решение вопроса об эффективности этих вакцин требует значительного времени.

Основные меры борьбы сводятся к пресечению возможностей инфицирования при половых контактах (механические способы защиты), борьбе с проституцией, наркоманией и гомосексуализмом; исключению условий передачи ВИЧ при медицинских манипуляциях (одноразовые шприцы, иглы, системы для переливания крови, проверка доноров и препаратов крови на ВИЧ и т. д.); санитарно-просветительной работе. С целью ограничения распространения ВИЧ-инфекции Минздравом утверждены соответствующие правила медицинского освидетельствования на выявление заражения вирусом иммунодефицита человека, регламентирующие комплекс профилактических мероприятий по борьбе с этой чрезвычайно опасной болезнью.

Конкретне цели:

Знать эпидемиологическую ситуацию на заболеваемость ВИЧ в Украине.

Знать классификацию ретровирусов и патогенных для человека представителей рода Lentivirus.

Объяснить почему вирусы называются ретровирусами.

Изучить пути передачи ВИЧ-инфекции и ее патогенез.

Ознакомиться с методами лабораторной диагностики и научиться трактовать результаты исследования.

Выучить препараты для лечения ВИЧ-инфекции.

Уметь:

Проводить отбор материала для лабораторных исследований в соответствии со стадией заболевания ВИЧ/СПИД.

Правильно оценивать результаты методов лабораторной диагностики и делать выводы.

 Теоретические вопросы:

Классификация ретровирусов.

Особенности строения ВИЧ. Антигенная структура.

Группы риска, пути заражения и патогенез ВИЧ-инфекции.

Клетки-мишени ВИЧ, механизм иммуно-супрессивного действия ВИЧ.

Стадии ВИЧ-инфекции. ВИЧ-ассоциированные инфекции.

Особенности иммунитета.

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции и СПИДа.

Перспективы иммунопрофилактики ВИЧ-инфекции.

Этиотропная терапия, механизм действия антиретровирусных препаратов.

Практические задания, выполняемые на занятии:

Зарисовка в протокол структуры ВИЧ.

Изучение по таблице метода ИФА.

Ознакомление с лабораторией и аппаратурой для постановки ИФА.

Оформление протокола.

Литература:

Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією.– Київ.: Вища шк., 1992.– 431с.

Воробьев А.В., Биков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. Микробиология.– М.: Медицина, 1998.– 336с.

Медицинская микробиология /Под ред. В.И. Покровского.– М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.– 768с.

Медицинская микробиология, иммунология и вирусология /Учебник для медицинских ВУЗов, Санкт–Петербург «Специальная литература», 1998.– 592 с.

Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник.– 2-е изд., перераб. и доп.– М.: Медицина, 1983,- 512с.

Конспект лекции.

Дополнительная литература:

Тiтов М.В. Iнфекцiйнi хвороби.- К., 1995.– 321с.

Шувалова Е.П. Инфекционные болезни.- М.: Медицина, 1990.- 559 с.

БМЭ.- Т. 1, 2, 7.

Гайдаш І.С., Флегонтова В.В. Медична вірологія.– Луганськ, 2002.– 357 с.

Короткие методические указания к практическому занятию:

В начале занятия проводится проверка уровня знаний студентов по теме.

Самостоятельная работа состоит из изучения структуры вируса по рисункам, слайдам и зарисовки ее в протокол. Дальше студенты знакомятся с лабораторией и аппаратурой для ИФА, по таблицам изучают иммуноферментный метод диагностики.

В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ итоговых результатов самостоятельной работы каждого студента.

Технологическая карта проведения практического занятия

№ п\п

Этапы

Время мин.

Способы обучения

Оборудования

Место проведения

1.

Проверка и кор-рекция выходного уровня подготов-ки к занятию

20’

Тестовые задания исходного уровня

Таблицы, атлас,

слайды

Учебная комната

2.

Самостоятельная работа

35’

Граф логичес-кой структуры

Аппаратура иммуно-логической лаборато-рии для проведения ИФА

3.

Самоконтроль и коррекция усвоен-ного материала

15’

Целевые обучающие программы

4.

Тестовый контроль

15’

Тесты

5.

Анализ резуль-татов работы

5’

Тестовые задания исходного уровня:

1. Укажите, какие структуры образуют геном ВИЧ?

A. Двухнитевая –РНК.

B. Двухнитевая +РНК.

C. Линейная ДНК.

D. Спирализованная ДНК.

E.Сегментированная РНК.

2. Ретровирусы обладают многими уникальными биологическими и биохимическими свойствами. Все перечисленные характеристики верны, кроме:

A. Содержат две идентичные молекулы +РНК в геноме.

B. Содержат РНК-зависимую ДНК-полимеразу

C. Содержат РНК

D. Для адекватной репликации встраиваются в геном хозяина.

E. Имеют суперкапсид.

3. Каким из перечисленных дезинфектантов можно обрабатывать использованные одноразовые шприцы перед утилизацией?

A. Перекисью водорода.

B. Лизоформом.

C. Хлорамином.

D. Спиртом.

E. Все перечисленное.

4. Какой интервал времени наблюдается между ВИЧ-инфицированием и развитием СПИДа?

A. 1-2 месяца после сероконверсии.

B. 1-2 года после сероконверсии.

C. 8-11 лет после сероконверсии.

D. 20-25 лет после сероконверсии.

E. 30-35 лет после сероконверсии.

5. Какой из перечисленных антигенов или вирусных белков ВИЧ будет обнаружен в сыворотке через неделю после заражения?

A. gp 24.

B. gp 41.

C. gp 120.

D. фермент обратная транскриптаза.

E. белок М.

6. Какое наиболее частой и грозное осложнение, дающее до 90% летальных исходов, у больных ВИЧ/СПИДом вызывает токсоплазма?

A. Миокардит.

B. Пневмония.

C. Некротизирующий энцефалит.

D. Абсцесс печени.

E. -.

7. Через сутки после случайного полового контакта мужчина обратился в кабинет анонимного обследования. При помощи какого метода исследования можно определить вероятное инфицирование?

A. ИФА.

B. ПЦР.

C. Иммуноэлектрофорез.

D. Вестернблот (иммуноблот).

E. РСК.

Целевые обучающие задания:

 1. При проведении ИФА у пациентки обнаружена положительная проба на ВИЧ. Какие следующие шаги должен предпринять врач в отношении этой женщины?

A. Приступить к лечению азидотимидином.

B. Провести обследование контактных на наличие антител к ВИЧ.

C. Применить вестернблот (иммуноблот).

D. выделить культуру вируса.

E. Определить соотношение Т4/Т8 лимфоцитов.

2. Разработано несколько серологических методов для обнаружения антител у ВИЧ-инфицированных людей, в том числе ИФА и вестрнблот. Вестернблот по отношению к ИФА является:

A. Наиболее чувствителен и более специфичен.

B. Менее чувствителен и менее специфичен.

C. Более чувствителен, не менее специфичен.

D. Менее чувствителен и более специфичен.

E. Одинаково чувствителен и одинаково специфичен.

3. Известно, что 80% детей больных ВИЧ/СПИДом погибают от пневмоний. Какой из перечисленных ниже возбудителей чаще всего является причиной таких пневмоний?

A. S. pneumoniae.

B. Pneumocystis carinii

C. K. pneumoniae

D. Chlamydophila pneumoniae

E. M. pneumoniae.

4. Препараты, используемые для лечения ВИЧ инфицированных пациентов, разделены согласно их действию на различные стадии репликации ВИЧ. Какой механизм действия группы препаратов, в которую входят саквиновир, ритонавир и др.?

A. Ингибируют обратную транскриптазу.

B. Ингибируют протеазы.

C. Ингибируют выход вируса из клетки.

D. Ингибируют синтез белка.

E. Ингибирую сборку и созревание дочерних популяций.

5. При лабораторном исследовании сыворотки крови у пациента выявлены антитела к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа. Какой специфический метод исследования позволит подтвердить диагноз "ВИЧ-инфекция" у данного больного?

А. Иммунолюминисцентное исследование

В. Исследование сыворотки крови в реакции иммуноблотинга.

С. Углубленное иммунологическое обследование.

D. Исследование сыворотки крови в реакции иммунодиффузии.

Е. Электронно-микроскопическое исследование клеток крови.

6. ВИЧ-инфицированный пациент периодически обследуется с целью выявления признаков активизации процесса. Назовите признак, который указывает на переход ВИЧ-инфекции в СПИД.

A. Снижение количества нейтрофилов.

B. Снижение количества  Т-хелперов.  

C. Саркома Капоши. Количество Т-хелперов ниже 200 кл/мкл.

D. Количество Т-хелперов ниже критического уровня.

E. Выявление антител к gp 41.

7. В инфекционное отделение госпитализирован больной С. с подозрением на ВИЧ-инфекцию. Какие из перечисленных субпопуляций иммунокомпетентных клеток повреждаются при СПИДе в первую очередь?

А. Т-супрессоры

В. Т-хелперы.

С. Т-киллеры.

D. В-лимфоциты.

Е. Макрофаги.

8. Больной М., 25 лет на протяжение последнего года потерял 11 кг веса тела, страдает от диареи, госпитализирован по приводу пневмоцистной пневмонии. Поставлен клинический диагноз – “СПИД”. Какими лабораторными методами наиболее точно можно подтвердить такой диагноз?

А. Реакцией иммуноблотинга.

B. Определением соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров.

C. Определением количества Т- и В-лимфоцитов.

D. Реакцией непрямой обратной  гемагглютинации.

E. Иммуноферментным методом.

9. После обследования больного с рецидивирующим афтозным стоматитом и сопутствующим кандидозом врач решил исключить ВИЧ-инфекцию. Какое исследование поможет прояснить ситуацию и поставить предварительный диагноз?

A. Иммуноферментный анализ

B. Реакция преципитации в геле

C. Реакция торможения гемагглютинации

D. Реакция гемагглютинации

E. Фазово-контрастная микроскопия

10. У больной стоматологической клинике организована лаборатория, в которой предполагается диагностика ВИЧ-инфекции. Какими препаратами должна  быть оснащена такая лаборатория?

А. Культурами клеток для выделения вируса.

В. Тест-системами для выявления специфических антител иммуноферментным методом.

С. Наборами специальных питательных сред.

D. Стандартными диагностическими сыворотками.

Е. Антигенами и гемолитической системой для реакции связывания комплемента.

11. При проверке крови доноров на станции переливания крови в сыворотке одного из них обнаружены антитела к вирусу иммунодефицита человека. Какой метод рекомендуется для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции?

А. Иммуноферментного анализа.

В. Электронной микроскопии.

С. Иммунофлюоресценции.

D. Вестернблота.

Е. Радиоиммунного метода.

12. Известно, что вирус иммунодефицита у человека принадлежит к семейству ретровирусов. Укажите основной признак, характеризующий данное семейство.

А. Наличие фермента обратной транскриптазы.

В. Наличие минус-РНК.

С. Выявление антигенов реакцией иммуноферментного анализа.

D. Отсутствие интеграции нуклеиновой кислоты в геном хозяина.

Е. -.

13. У больного 25 лет из многочисленных кожных пустул высевается золотистый стафилококк в ассоциации с эпидермальным стафилококком. В анализе мокроты обнаружена пневмоциста каринии, в испражнениях - криптоспоридии, вульгарный протей и грибы рода кандида. При каком заболевании встречается такое множественное инфицирование условно-патогенными микроорганизмами?

A. Сепсис

В. Медикаментозный агранулоцитоз

C. СПИД.

D. Дисбактериоз

Е. Сахарный диабет

14. У больного с лихорадкой неясной этиологии, иммунодефицитным состоянием, поражением нервной и пищеварительной систем предварительно диагностирован СПИД. Какие методы диагностики необходимо использовать для подтверждения диагноза?

A. Реакцию связывания комплемента.

B. Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг

С. Реакцию агглютинации.

D. Реакцию гемадсорбции.

Е. Реакцию гемагглютинации.

15. В специализированной клинике пациенту назначили комбинацию препаратов, которые ингибируют репродукцию ВИЧ. Укажите, к какой группе принадлежат препараты, которые обязательно входят в комплексное противовирусное лечение.

А. Интерлейкины.

В. Антибиотики широкого спектра действия.

С. Аналоги нуклеозидов.

D. Криксиван.

Е. Бисептол.

16. С целью диагностики ВИЧ-инфекции исследуют сыворотку крови для выявления специфических антигенов методом твердофазного иммуноферментного анализа. Какие энзиммеченные антитела при этом используют?

А. Против белка gр14.

В. Против белка р24.

С. Против белка gp120.

D. Против белка gр17.

Е. Против иммуноглобулинов человека.

17. Вирус иммунодефицита человека, имея на своей поверхности антигены gр41 и gр120, взаимодействует с клетками-мишенями организма. Выберите среди названных антигены лимфоцитов человека, с которыми комплементарно связывается gр120 вируса.

А. СD4.

В. СD3.

С. СD8.

D. СD19.

Е. СD28.

Алгоритм лабораторной работы:

Проверка уровня подготовки студентов к занятию: тесты и опрос.

Изучение классификации ретровирусов.

Изучение схемы строения вируса иммунодефицита человека.

Изучение препаратов для антиретровирусной терапии.

Изучение схемы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции и СПИДа.

Изучение механизма реакции иммуноблотинга.

Оформление протокола.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

579. Сущность процесса обучения. Закономерности и принципы процесса обучения 82 KB
  Педагогически адаптированная система знаний и умений из какой-либо отдельной области действительности и соответствующей ей деятельности по усвоению и использованию знаний и умений. Материальные и идеальные объекты, использующиеся в процессе обучения для реализации дидактиеских целей.
580. Контейнерная транспортная система 80 KB
  Классификация технических средств контейнерной транспортной системы. Подъемно-транспортное оборудование, применяемое для перегрузки. Влияние КТС на организацию перевозочного процесса.
581. Основные понятия стресса. Техники снятия стресса 78 KB
  Несоответствие между нагрузкой и имеющимися в наличии ресурсами человека. Неблагоприятные социальные условия. Ситуации повышенной моральной или материальной ответственности. Затылочно-лобная самокоррекция. Стирание стрессовой информации из памяти.
582. Макроэкономика, краткий конспект 470.5 KB
  Характерные особенности макроэкономики как науки. Особенности макроэкономического анализа. Макроэкономические модели. Экзогенные и эндогенные переменные. Запасы и потоки. Модель круговых потоков. Субъекты и рынки кругооборота. Основные макроэкономические тождества.
583. Графическое представление данных (построение диаграмм) 83 KB
  Основные понятия и термины, используемые при работе с диаграммами. Построение, редактирование и форматирование различных диаграмм.
584. Использование и способы работы с переменными в Visual Basic 57 KB
  Ознакомиться с типами переменных, их описанием в программе. Тип Variant, переменная этого типа может иметь любой размер.
585. Теория и практика семейного права. Нормы семейного права и семейное законодательство 94 KB
  Нормы семейного права и семейное законодательство. Цель и принцип семейного законодательства. Права и обязанности родителей и детей. Форма воспитания детей, оставшихся без попечения родителей. Обязанности детей по содержанию родителей и заботе о них.
586. Правосторонняя нижнедолевая пневмония 72 KB
  История настоящего заболевания. Осмотр системы органов дыхания, пищеварения и брюшной полости. Клинический анализ крови. Выявления поражения миокарда, нарушения проводимости, ритма, возбудимости. Подтверждения клинического диагноза, для выявления воспалительных инфильтратов в легких и туберкулезных очагов
587. Роль ТНК и экономической интеграции в современной мировой экономике 188 KB
  Понятие,специфика деятельности и причины возникновения транснациональных коорпараций. Деятельность транснациональных корпораций в условиях глобализации. Развитие транснациональных корпораций на современном этапе в Республике Беларусь. Эволюция транснациональных корпораций в системе современных международных экономических отношениях.