66179

Лабораторная диагностика гриппа и ОРЗ

Практическая работа

Медицина и ветеринария

Выявлены в последние годы новые свойства возбудителя гриппа способность обмениваться генетической информацией с возбудителями гриппа животных и птиц длительное время сохраняться в организме человека...

Русский

2014-08-14

89 KB

18 чел.

Методические указания для студентов к практическому занятию № 2.

Тема: Лабораторная диагностика гриппа и ОРЗ.

Цель: Изучение лабораторной диагностики гриппа и ОРЗ.

Модуль 3. Общая и специальная вирусология.

Содержательный модуль 16. Специальная вирусология.

Тема 2: Лабораторная диагностика гриппа.

Актуальность темы: В настоящее время грипп является наиболее распространенной инфекцией на земном шаре и регистрируется на всех континентах. Особенностью этой инфекции является быстрота распространения. При эпидемических вспышках болеет до 30-50% населения пораженного региона, что приводит к значительным экономическим затратам. Так грипп остается не контролируемой инфекцией. Во время эпидемии страдают пожилые и ослабленные люди, особенно те, которые имеют хронические заболевания сердца, легких, а также дети, увеличивается количество смертей от сердечно-сосудистых, легочных заболеваний.

Выявлены в последние годы новые свойства возбудителя гриппа – способность обмениваться генетической информацией с возбудителями гриппа животных и птиц, длительное время сохраняться в организме человека после выздоровления и даже, как считают, может быть одним из возможных факторов развития у человека медленных инфекций. Все это усиливает значимость этой проблемы и необходимость дальнейшего изучения возбудителя гриппа.

Вирусы гриппа и других острых респираторных заболеваний

Группа острых респираторных (от лат. respiratio - дыхание) вирусных инфекций (ОРВИ) включает большое количество наиболее распространенных болезней, характеризующихся поражением различных отделов дыхательных путей и аэрогенным механизмом передачи.

ОРВИ могут вызывать более 200 вирусов: вирусы гриппа, парагриппа, респираторно-синтициальный вирус, риновирусы, коронавирусы, реовирусы, аденовирусы, некоторые серотипы вирусов Коксаки и ECHO. Все эти вирусы принадлежат к разным семействам и родам, отличаются между собой по биологическим свойствам и поэтому требуют индивидуального подхода при проведении лабораторных исследований.

Наибольшее значение в патологии человека имеют вирусы гриппа. Среди других вирусов - возбудителей ОРВИ - наибольший удельный вес занимают риновирусы и коронавирусы; вирусы парагриппа и респираторно-синцитиальный вирус могут вызывать тяжелые воспалительные заболевания нижних отделов дыхательных путей.

Вирусы гриппа

Грипп - острое респираторное заболевание, характеризующееся поражением слизистых оболочек верхних дыхательных путей, лихорадкой, симптомами общей интоксикации, нарушением деятельности сердечно-сосудистой и нервной систем. Грипп отличается склонностью к эпидемическому и пандемическому распространению благодаря высокой контагиозности и изменчивости возбудителя.

В 1933 г. У. Смит, К. Эндрюс и П. Лейдлоу от больных гриппом выделили вирус, названный впоследствии вирусом гриппа типа А. В 1940 г. были открыты вирусы гриппа типа В, а в 1947 г. - типа С. В России первые вирусы гриппа были выделены в 1936 г. А. А. Смородинцевым и отнесены к типу А.

Таксономия, классификация. РНК-содержащие вирусы относятся к семейству Orthomyxoviridae (от греч. orthos - правильный, myxa - слизь). Семейство включает два рода: род Influenzavirus объединяет вирусы гриппа типов А и В, род Influenza С представлен вирусом гриппа типа С.

Морфология и химический состав. Вирионы имеют сферическую форму диаметром 80-120 нм, реже палочковидную и нитевидную; состоят из сердцевины и наружной липопротеидной оболочки. Сердцевина содержит однонитчатую линейную фрагментированную минус-нитевую РНК, белковый капсид, окруженный дополнительной мембраной - слоем матриксного белка. Нуклеокапсид имеет спиральный тип симметрии. На поверхности суперкапсидной оболочки имеются шипы гликопротеидной природы, одни из которых являются гемагглютинином, другие - нейраминидазой.

Культивирование. Для культивирования используют куриные эмбрионы, культуры клеток, иногда лабораторных животных.

Антигенная структура. Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены. Внутренние сердцевидные антигены являются типоспецифическими, на основании чего вирусы гриппа подразделяются на типы А, В и С, поверхностные представлены гемагглютинином (Н) и нейраминидазой (N). Н - основной специфический антиген, вызывающий образование вирус-нейтрализующих антител и обеспечивающий адсорбцию вируса на клетках, в том числе эритроцитах человека или животных, в результате чего происходит их склеивание (гемагглютинация). N вызывает образование антител, частично нейтрализующих вирусы; являясь ферментом, N участвует в освобождении вирусов из клетки.

Характерной особенностью вирусов гриппа, в основном типа А, является изменчивость антигенов Н и N. Известны три разновидности Н и две разновидности N. В зависимости от их сочетания выделяют три подтипа вируса гриппа А человека: H1N1, H2N2, H3N2, соответственно A1, A2, A3. Внутри подтипов имеется множество антигенных вариантов, отличающихся по структуре Н- и N-антигенов.

Изменчивость поверхностных антигенов связана с фрагментарным строением РНК вируса и может происходить в виде дрейфа и шифта. Дрейф - постоянно осуществляющиеся незначительные изменения Н- и N-антигенов в результате точечных мутаций, приводящие к возникновению новых антигенных вариантов вируса. Шифт (скачок) - редко встречающиеся значительные изменения Н- и N-антигенов в результате рекомбинаций, приводящие к появлению новых подтипов вируса.

По сравнению с вирусами гриппа типа А антигенная структура вирусов гриппа типа В изменяется только по типу дрейфа, а тип С не имеет N-антигена и мало изменчив.

Резистентность. В воздухе вирусы гриппа могут сохранять инфекционные свойства при комнатной температуре в течение нескольких часов; чем выше температура и относительная влажность воздуха, тем быстрее инактивируются вирусы. Возбудители гриппа чувствительны к действию УФ-лучей, многим дезинфицирующим средствам (формалину, этиловому спирту, фенолу, хлорамину), жирорастворителям; в жидкой среде инактивируются при температуре 50-600С в течение нескольких минут. Длительное время сохраняются в замороженном состоянии и в глицерине.

Восприимчивость животных. В естественных условиях вирусы гриппа типа А поражают как человека, так и животных; вирусы типов В и С . только человека. Среди лабораторных животных к вирусам гриппа чувствительны африканские хорьки, сирийские хомяки, белые мыши. Заболевание характеризуется поражением легких и нередко заканчивается гибелью животных.

Эпидемиология. Из всех острых респираторных вирусных инфекций грипп является наиболее массовым и тяжелым заболеванием. Пандемии и эпидемии гриппа охватывают до 30-50 % населения земного шара и более, нанося огромный ущерб здоровью людей и экономике стран. Так, пандемия гриппа «испанки», вызванная вирусом A (H1N1) в 1918-1920 гг., охватила около 1,5 млрд человек и унесла более 20 млн жизней. Восприимчивость людей к гриппу высокая. Болеют все возрастное группы населения, преимущественно в зимнее время года.

Возникновение пандемий и крупных эпидемий обычно связано с появлением нового подтипа вируса гриппа А. Ежегодные эпидемические вспышки вызываются новыми антигенными вариантами одного подтипа. В последние годы эпидемии гриппа связаны с вирусом гриппа A (H3N2), хотя среди населения продолжают циркулировать вирусы гриппа A (H1N1) и В.

Источником гриппозной инфекции является больной человек с клинически выраженной или бессимптомной формой. Путь передачи - воздушно-капельный (при разговоре, кашле, чиханье).

Патогенез и клиническая картина. Вирусы гриппа внедряются и репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой оболочки верхних дыхательных путей, откуда проникают в кровь и разносятся по всему организму. Продукты распада поврежденных клеток и некоторые вирусные белки оказывают токсическое действие на различные органы и системы организма.

Инкубационный период короткий - от нескольких часов до 1-2 сут. Для гриппа характерны острое начало, высокая температура тела, общая интоксикация, выражающаяся в недомогании, головной боли, боли в глазных яблоках, поражение дыхательных путей различной степени тяжести. Лихорадочное состояние при гриппе без осложнений продолжается не более 5-6 дней. Тяжесть и исход болезни нередко связаны с осложнениями, вызванными самим вирусом гриппа (гриппозная пневмония, острый отек легких) или условно-патогенными бактериями. Развитию осложнений способствует угнетающее действие вирусов гриппа на процессы кроветворения и иммунную систему организма.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется стойкий типо-, подтипе- и вариантоспецифический иммунитет, который обеспечивается клеточными и гуморальными факторами защиты. Большое значение имеют антитела класса IgA. Пассивный естественный иммунитет сохраняется у детей до 8-11 мес жизни.

Лабораторная диагностика. Материалом для обнаружения вируса или вирусного антигена служат мазки-отпечатки со слизистой оболочки носовой полости, отделяемое носоглотки, при летальных исходах - кусочки легочной ткани или мозга. Экспресс-диагностика основана на выявлении вирусного антигена с помощью РИФ; разработана тест-система для ИФА. Для выделения вирусов используют куриные эмбрионы. Индикацию вирусов гриппа осуществляют при постановке реакции гемагглютинации. Идентифицируют выделенные вирусы поэтапно: типовую принадлежность определяют с помощью РСК, подтип - РТГА. Серодиагностику проводят с помощью РСК, РТГА, РН в культуре клеток, реакции преципитации в геле, ИФА.

Специфическая профилактика и лечение. Для специфической профилактики используют живые и инактивированные вакцины из вирусов гриппа A (H1N1), A (H3N2) и В, культивируемых в куриных эмбрионах. Существует три типа инактивированных вакцин: вирионные (корпускулярные); расщепленные, в которых структурные компоненты вириона разъединены с помощью детергентов; субъединичные, содержащие только гемагглютинин и нейраминидазу. Вакцину из трех вирусов гриппа вводят интраназально в одной прививочной дозе по специальной схеме. Вакцинация показана определенным контингентам, имеющим высокий риск заражения.

Проходит испытания культуральная инактивированная вакцина. Ведутся разработки по созданию гриппозных вакцин нового поколения: синтетических, генно-инженерных. К сожалению, в отдельные годы отмечается довольно низкая эффективность вакцинации вследствие высокой изменчивости вирусов гриппа.

Для лечения, а также экстренной профилактики гриппа применяют химиотерапевтические противовирусные препараты (ремантадин, виразол, арбидол и др.), препараты интерферона и иммуномодуляторы (дибазол, левамизол и др.). При тяжелом течении гриппа, особенно у детей, показано применение донорского противогриппозного иммуноглобулина, а также препаратов, являющихся ингибиторами клеточных протеаз: гордокса, контрикала, аминокапроновой кислоты.

Конкретные цели:

  •  Трактовать стадии взаимодействия вируса с клеткой.
  •  Ознакомиться с методами культивирования вирусов.
  •  Ознакомиться со строением куриного эмбриона.
  •  Указать специфические изменения в эмбрионе.
  •  Ознайомиться с техникой введения вирусосодержащего материала в аллантоисную полость.
  •  Ознайомиться с понятием о клеточной культуры и ЦПД вируса гриппа в ней.

Уметь:

  •  Заражать куриные эмбрионы в аллантоисную полость.
    •  Вскрывать куриные эмбрионы.
    •  Изучить изменения на хорион-аллантоисной оболочке, вызванные вирусом гриппа.
    •  Забирать аллантоисную жидкость из куриного эмбриона.
    •  Ставить реакцию гемагглютинации и проводить ее учет.

Теоретические вопросы:

  1.  Классификация вирусов, вызывающих острые респираторные заболевания.
  2.  Характеристика вирусов гриппа.
  3.  Строение вириона.
  4.  Строение генома (взаимодействие вируса с клеткой).
  5.  Антигенная структура вирусов гриппа.
  6.  Изменчивость вирусов гриппа.
  7.  Основные методы культивирования вируса гриппа (заражение куриного эмбриона, культуры клеток).
  8.  Патогенез гриппа.
  9.  Микробиологическая диагностика гриппа.
  10.  Особенности противогриппозного иммунитета. Антитела. Интерферон. Механизм их действия.
  11.  Вакцины и профилактические препараты.

Практические задания, которые выполняются на занятии:

  1.  Вскрытие куриного эмбриона.
    1.  Забор аллантоисной жидкости.
    2.  Постановка и учет РГА.
    3.  Разбор и запись схемы лабораторной диагностики гриппа.
    4.  Микроскопия и зарисовка демонстрационных препаратов в протокол занятия.
    5.  Оформление протокола.

Литература:

  1.  Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією.– Київ: Вища школа, 1992.– 431 с.
  2.  Воробьев А.В., Быков А.С., Пашкола Е.П., Рибакова А.М. Микробиология.– М.: Медицина, 1998.– 336 с.
  3.  Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского.– М.: ГЄОТАР-МЕД, 2001.– 768 с.
  4.  Медицинская микробиология, вирусология и иммунология /Под редакцией академика А.А. Воробьева, М.: Медицинское информационное агентство, 2004.– 691 с.
  5.  Конспект лекции.


Дополнительная литература:

  1.  Збірник завдань для підготовки до тестового екзамену Крок-1. Загальна лікарська підготовка.– Київ.: Медицина, 2004.- С. 300-333.
  2.  Методические указания для преподавателей к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии.– Харьков,1986.– 125 с.
  3.  Сборник тестовых заданий для самоподготовки по медицинской микробиологии и вирусологии.– Харьков, 2005.– 28 с.

Краткие методические указания к работе на практическом занятии.

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.

Самостоятельная работа состоит из заражения куриного эмбриона в хорионалантоисную оболочку. Студенты проводят вскрытия куриного эмбриона, забирают алантоисную жидкость, выполняют РГА и проводят ее учет. Студенты проводят микроскопию демонстрационных препаратов, зарисовывают их в альбом и дают необходимые пояснения. Записывают схемы лабораторной диагностики гриппа.

В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ итоговых результатов самостоятельной работы каждого студента.

Технологическая карта проведения практического занятия

№ п\п

Этапы

Время мин.

Способы обучения

Оборудования

Место проведения

1.

Проверка и кор-рекция выходного уровня подготов-ки к занятию

20’

Тестовые задания исходного уровня

Таблицы, атлас

Учебная комната

2.

Самостоятельная работа

35’

Граф логичес-кой структуры

Куриные эмбрионы, необходимые компо-ненты для постанов-ки РГА, демонстра-ционные препараты, иммерсионный мик-роскоп.

3.

Самоконтроль и коррекция усвоен-ного материала

15’

Целевые обучающие программы

4.

Тестовый контроль

15’

Тесты

5.

Анализ резуль-татов работы

5’

Целевые обучающие задания:

1. С приближением эпидемии гриппа районный эпидемиолог составляет заявку на профилактические препараты. Какой из них будет содействовать формированию активного иммунитета и будит наименее реактогенным?

А. Субединичная вакцина

В. Живая вакцина

С. Убитая вакцина

D. Донорський γ-глобулин

Е. Лейкоцитарный интерферон

2. В городе - эпидемия гриппа. Какой из перечисленных ниже препаратов можно рекомендовать людям для неспецифической профилактики заболевания?

А. Ремантадин

В. Противогриппозную вакцину

С. Пенициллин

D. Противогриппозный иммуноглобулин

Е. Противогриппозную сыворотку

3. Вирус гриппа содержит внутренние антигены – нуклеопротеидный (NP), полимеразные (Р1, Р2, Р3), матриксный белок (М) и внешние антигены - гемагглютинин (Н) и нейраминидазу (N). Какие из них играют основную роль в создании иммунитета к гриппозной инфекции?

А. Гемагглютинин и нейраминидаза

В. Нуклеопротеидные антигены

С. Матриксный белок

D. Полимеразные белки

Е. Нейраминидаза и нуклеопротеид

4. В паталогоанатомическом отделении инфекционной больницы доставлен труп человека с предварительным диагнозом: «Грипп?». Какие исследования необходимо применить для подтверждения этого диагноза?

А. Выявление антител в реакции связывания комплемента

В. Электронно-микроскопическое выявление вируса

С. Выявление внутриклеточных включений при световой микроскопии

D. Выявление высоких титров антител в реакции торможения гемагглютинации

Е. Выделение и серологическая идентификация вируса

5. Заражение куриных эмбрионов - основной метод выделения вируса гриппа. При введении в куриный эмбрион исследуемого материала (смыва из носоглотки) с целью деконтаминации к нему предварительно добавляют:

А. Формалин

В. Калийперйодат

С. Раствор Игло

D. Стрептомицин и пенициллин

Е. Эфир

6. Для выделения вируса гриппа из доставленного материала в лаборатории использовали куриные эмбрионы. Какой из перечисленных показателей является основным для определения накопления вируса через 48-72 часа?

А. РА

В. РГА с аллантоисной жидкостью

С. Гибель куриного эмбриона

D. Наличие крови в аллантоисной оболочке

Е. Образование бляшек на хорион-аллантоисной оболочке

7. В период острой респираторной инфекции для экспресс-диагностики гриппа проводится выявление специфического вирусного антигена в исследуемом материале (слизь из носоглотки). Какую серологическую реакцию используют для этого?

А. Связывание комплемента

B. Иммунофлюоресценции

C. Агглютинации

D. Преципитации

Е. Оксопитации

8. От больного с подозрением на грипп был взят патологический материал (носоглоточный смыв), которым заразили куриные эмбрионы в хорион-аллантоисную полость. С помощью какой реакции можно подтвердить, что в хорион-аллантоисной жидкости действительно накапливается вирус гриппа?

А. Преципитации

B. Агглютинации

C. Гемадсорбции

D. Гемагглютинации

Е. Торможения гемагглютинации

9. С целью определения типа и подтипа вируса, вызвавшего грипп, были проведены вирусологические исследования. Какая из перечисленных реакций может быть использована для идентификации вируса гриппа?

А. РА

B. РП

C. РГГА

D. РГА

Е. Реакция гемадсорбции

10. Исскуственный пассивный иммунитет против гриппа создается:

A. Введеним живой вакцины

B. Введеним интерферона

C. Трансплацентарным переходом антител

D. Введением убитой вакцины

E. Введеним гамма-глобулина

11. Какие из приведенных антигенов определяют подтип вируса гриппа А?

A. РНК

B. Матриксный белок

C. Полимераза

D. Нуклеопротеид

E. Гемагглютинин и нейраминидаза

Алгоритм лабораторной работы:

  1.  Изучение методов культивирования вирусов гриппа.
    1.  Заражение куриного эмбриона в хорион-аллантоисную оболочку.
      1.  Постановка и учт реакции гемагглютинаци.
      2.  Освоение реакции торможения гемагглютинации.
      3.  Вскрытие куриных эмбрионов зараженных смывом из зева больного гриппом, забор алантоисной жидкости.
      4.  Микроскопия и анализ демонстрационных препаратов.
      5.  Зарисовка препаратов в протокол.
      6.  Оформление протокола.


Граф логической структуры темы

«ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ»

Мазки, смывы из носоглотки, мокрота и др.          Парные сыворотки крови

1-й этап   Экспресс-методы   Вирусологическое исследование      Серологические сыворотки крови

 Риноцитоскопия  ИФМ  Заражение куриных  Заражение культур  Реакция нейтрализации

          эмбрионов        клеток   (аденовирусная инфекция,

  Ориентировочный ответ          парагрипп)

        через 2-3 часа

2-й этап       Индикация в РГА  Индикация по ЦПД  РСК

           ИФМ, методы   РТГА (грипп, парагрипп,

3-й этап       Идентификация РСК, гемадсорбции  аденовирусная инфекция)

       РТГА и реакции

       нейтрализации  Идентификация в  Окончательный ответ

           ИФМ, РТГА, РСК,

           реакции нейтрализации

        Окончательный ответ через 3-21 день


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

45324. Принципы российского федерализма 27.75 KB
  Российская Федерация состоит из республик краев областей городов федерального значения автономной области автономных округов равноправных субъектов Российской Федерации. В составе Российской Федерации в соответствии со ст. Государственная целостность Российской Федерации. Государственная целостность федеративного государства гарантируется тем что государственный суверенитет как верховенство и независимость государственной власти на всей своей территории и в международных отношениях принадлежит только Федерации но...
45325. Избирательный процесс в РФ: общая характеристика 25.17 KB
  Представительный орган муниципального образования Представительный орган муниципального образования может осуществлять свои полномочия в случае избрания не менее двух третей от установленной численности депутатов. Уставом муниципального образования определяется правомочность заседания представительного органа муниципального образования. Заседание представительного органа муниципального образования не может считаться правомочным если на нем присутствует менее 50 процентов от числа избранных депутатов.
45326. Право на объединение, многопартийность и правовой статус политических партий в РФ 25.91 KB
  Политическая партия определяется как общественное объединение созданное в целях участия граждан Российской Федерации в политической жизни общества посредством формирования и выражения их политической воли участия в общественных и политических акциях в выборах и референдумах а также в целях представления интересов граждан в органах государственной власти и органах местного самоуправления. Деятельность политических партий должна осуществляться на принципах добровольности равноправия самоуправления законности и гласности. Иначе...
45327. Гражданство РФ - принципы, основания его приобретения и прекращения 22.21 KB
  Основы конституционного строя детальная же регламентация этого конституционно-правового института закреплена в Федеральном законе О гражданстве Российской Федерации. Конституция РФ и Закон о гражданстве закрепляют следующие принципы гражданства Российской Федерации: Единство гражданства. В соответствии с этим принципом республики субъекты РФ не могут устанавливать собственное гражданство предусматривающее изъятия из общего единого статуса гражданина Российской Федерации; гражданин республики одновременно является...
45328. Референдум – понятие, виды правовое регулирование 25.75 KB
  Форма прямого волеизъявления граждан РФ по наиболее важным вопросам государственного и местного значения в целях принятия решений осуществляемого посредством голосования граждан РФ обладающих правом на участие в референдуме. Виды референдума в зависимости от территории: 1 всероссийский референдум он проводится по вопросам общефедерального значения на основании решения Президента РФ; 2 референдум субъекта РФ он проводится по вопросам ведения соответствующего субъекта РФ или совместного ведения РФ и субъектов РФ если указанные вопросы не...
45329. Функции Президента Российской Федерации 21 KB
  Назначение с согласия Государственной Думы Председателя Правительства РФ других членов Правительства РФ направление его политики и принятие решения об отставке Правительства РФ; 2 представление Государственной Думе кандидатуры на должность Председателя Центрального банка РФ постановление перед ней вопроса об освобождении от должности Председателя Центрального банка РФ; 3 представление Совету Федерации кандидатур для назначения на должности судей Конституционного Суда РФ...
45330. Порядок избрания и освобождения от должности Президента Российской Федерации 23.1 KB
  Порядок избрания и освобождения от должности Президента Российской Федерации. Президент Российской Федерации избирается сроком на шесть лет гражданами Российской Федерации на основе всеобщего равного и прямого избирательного права при тайном голосовании. Президентом Российской Федерации может быть избран гражданин Российской Федерации не моложе 35 лет постоянно проживающий в Российской Федерации не менее 10 лет Одно и то же лицо не может занимать должность Президента Российской Федерации более двух сроков подряд. Порядок выборов Президента...
45331. ИНСТИТУТ УПОЛНОМОЧЕННОГО ПО ПРАВАМ ЧЕЛОВЕКА В РФ 22.83 KB
  ИНСТИТУТ УПОЛНОМОЧЕННОГО ПО ПРАВАМ ЧЕЛОВЕКА В РФ В РФ защитой прав и свобод граждан их соблюдения государственными органами власти органами местного самоуправления и должностными лицами занимается Уполномоченный по правам человека в РФ. В пределах своей компетенции Уполномоченный по правам человека в РФ: 1 рассматривает жалобы граждан РФ и находящихся на территории РФ иностранных граждан и лиц без гражданства; 2 рассматривает жалобы на решения или действия государственных органов органов местного самоуправления должностных лиц...
45332. Государственная Дума Российской Федерации - палата Федерального Собрания Российской Федерации 26.28 KB
  Полномочия местного самоуправления это закрепленные федеральным законодательством а также нормативными правовыми актами субъектов Российской Федерации и правовыми актами органов местного самоуправления за населением соответствующих территорий выборными и иными органами местного самоуправления права и обязанности связанные с реализацией задач и функций местного самоуправления на соответствующей территории. Полномочия местного самоуправления реализуются как непосредственно населением городских и сельских поселений других территорий путем...