87127

Пути утилизации аммиака в организме

Лекция

Медицина и ветеринария

Образование мочевины орнитиновый цикл имеет большое значение для сохранения здоровья. Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Русский

2015-04-17

95.02 KB

6 чел.

Тема22. Пути утилизации аммиака в организме.

Актуальность темы

Результатом процессов дезаминирования и катаболизма аминокислот, нуклеотидов, биогенных аминов является образование аммиака. Кроме того, большое количество аммиака образуется в кишечнике при гниении белков, а также в скелетных мышцах при усиленной физической нагрузке. Аммиак - токсичное вещество, поэтому в организме существуют специальные пути его детоксикации.

Наибольшую роль в процессе обезвреживания аммиака играет печень, в которой аммиак превращается в нетоксичную мочевину. Образование мочевины (орнитиновый цикл) имеет большое значение для сохранения здоровья.

Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Цель занятия:

 уметь характеризовать основные пути образования и обезвреживания аммиака в организме;

 усвоить методы определения мочевины в биологических жидкостях, уметь интерпретировать полученные данные.

Конкретные цели:

 Трактовать метаболические закономерности образования и обезвреживания аммиака, циркуляторного транспорта аммиака, биосинтеза мочевины.

 Охарактеризовать химические превращения в орнитиновом цикле.

 Анализировать изменения в системах транспорта и обезвреживания аммиака при генетических аномалиях ферментов его метаболизма.

 Количественно определять мочевину в биологических жидкостях и интерпретировать полученные результаты.

Теоретические вопросы

1. Основные пути и источники образования аммиака в организме, причины и проявления

его токсичности.

2. Важнейшие механизмы обезвреживания аммиака:

• восстановительное аминирования а-кетоглутарата;

• образование амидов дикарбоновых кислот;

• образование аммонийных солей в норках;

• образование мочевины в печени.

3. Циркуляторный транспорт аммиака. Роль аланина в транспорте азота аминокислот для синтеза мочевины.

4. Особенности обезвреживания аммиака в нервной ткани.

5. Биосинтез мочевины:

• локализация процесса,

• последовательность реакций;

• биологическая роль,

• регуляция.

6. Взаимосвязь орнитинового цикла сечовиноутворення с ЦТК и Трансаминирование.

7. Генетические аномалии ферментов цикла образования мочевины. Гипераммониемии.

Практическая работа

Опыт 1. Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче по реакции с диацетилмонооксимом.

Принцип метода: Мочевина в кислой среде образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и трехвалентного железа  комплексное соединение красного цвета, оптическая плотность которой при зеленом светофильтре (500 - 560 нм) пропорциональна концентрации мочевины.

 

 

Материальное обеспечение: раствор трихлорацетатнои кислоты (ТХУ) (100 г / л), раствор мочевины (7 ммоль / л - 42г / 100 мл), цветной реактив - до 30 мл рабочего раствора железа хлорида (основной раствор - 5 г железа хлорида доводят до 100 мл водой и подкисляют добавлением 1 мл серной кислоты конц.; из основного раствора готовят рабочий 1 мл основного раствора железа хлорида доводят до 100 мл водой, добавляют 8 мл конц. серной кислоты и 1 мл 85% ортофосфорной кислоты; хранят 2 недели в темной посуде) добавляют 20 мл воды; 1 мл раствора диацетилмонооксиму (25 г / л, водный стабильный раствор) и 0,25 мл раствора тиосемикарбазида (2,5 г / л водный раствор стабилен при хранении в темной посуде при комнатной температуре); спектрофотометр; водяная баня, нагретая до температуры 100 С; сыворотка крови, суточная моча профильтрованная, разведенная физиологическим раствором натрия хлорида или дистиллированной водой 1: 50 или 1: 100 Цветной раствор готовят каждый раз перед использованием. Образцы: сыворотка (плазма) крови липемична или гемолизированных; цельная кровь (плазма).

Ход работы. Ход определения проводят по таблице:

Реактив

Проба

опытная

стандартная

контрольная

Сыворотка крови

0,02 мл

-

-

Эталонный раствор мочевины (7 ммоль/л.)

-

0,02 мл

-

Н2О

-

-

0,02 мл

Раствор диацетилмонооксима (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Раствор тиосемидкарбазида (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Пробирки закрывают алюминиевой фольгой, содержимое пробирок перемешивают и кипятят на водяной бане ровно 10 мин. Одновременно обрабатывают исследовательскую, стандартную и контрольную пробы. Затем пробирки быстро охлаждают под струей холодной воды. Колориметрують исследовательскую пробу и стандартную против контроля при длине волны 530-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение оптической плотности следует проводить в течение не более 15 мин после охлаждения.

Если после нагрева раствор в первой пробирке мутный, то его центрифугируют в течение 5 мин или депротеинують раствором трихлоруксусной кислоты.

Расчет. Концентрацию мочевины рассчитывают по формуле

                                             Едос

                                С =                        · 16,64 ммоль/л,

                                               Еет   

где - С - концентрация мочевины;

       Едос - оптическая плотность опытной пробы;

              Еет    - оптическая плотность эталонной пробы.

Примечания:

1 При содержании мочевины более 25 ммоль / л пробу нужно развести дистиллированной водой и повторить анализ. Результат умножить на разведение.

2 Гемолитические и липемични сыворотки депротеинують. Для этого 0,1 мл сыворотки смешивают с 0,9 мл раствором трихлоруксусной кислоты и центрифугируют 5 мин. Так же обрабатывают эталон. Для анализа отбирают исследования так же, как для сыворотки без депротеинування. Этим методом можно исследовать и кровь.

Объяснить полученный результат. Сделать вывод.

Значение для фармации и клиники. Синтез мочевины происходит в печени (цитозоль и митохондрии), главным образом, из аммиака, который образуется при дезаминировании аминокислот, распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. За сутки с мочой здорового человека выделяется 20 - 35 г (или 333 - 583 ммоль) мочевины. В норме содержание мочевины в сыворотке крови составляет 3,3 - 8,3 ммоль / л.

Увеличение содержания мочевины в сыворотке крови является одной из главных признаков нарушения выделительной функции почек. Кроме того, рост уровня мочевины в сыворотке крови может иметь внепочечным происхождения: потеря организмом жидкости (рвота, понос, обезвоживание), усиленный распад белков (острая жировая дистрофия печени). Уменьшение содержания мочевины может наблюдаться при заболеваниях печени (паренхиматозная желтуха, цирроз печени) вследствие нарушения его синтеза в этом органе.

Повышенное содержание мочевины в моче наблюдается при дефиците белка в пище, злокачественной анемии, лихорадке, интенсивном распаде белков в организме, после приема салицилатов, при отравлении фосфором. Пониженное содержание мочевины наблюдается при циррозе печени, паренхиматозной желтухи, нефрите, ацидозе, уремии.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

22864. Право потребителя на качество товара в соответствии с Законом РФ «О защите прав потребителей» 16.78 KB
  При отсутствии в договоре условий о качестве товара (работы, услуги) продавец (исполнитель) обязан передать потребителю товар (выполнить работу, оказать услугу), соответствующий обычно предъявляемым требованиям и пригодный для целей
22865. Сортамент товаров природный и товарный. Принципы деления на товарные сорта 18.98 KB
  Сортамент товаров. Одной из важных задач оценки качества является установление градаций качества стандартной продукции, которые представлены сортами. Как уже указывалось ранее, сорт - категория качества продукции одного наименования, но отличающаяся от другой категории значениями показателей.
22866. Оценка качества товаров. Способы выражения результатов оценки 19.94 KB
  Уровень качества продукции – важнейшая характеристика ее конкурентоспособности. Нередко ставится знак равенства между конкурентоспособностью товара и его качеством.
22867. Обеспечение качества и количества товаров. Сохраняющие факторы 21.91 KB
  Хранение - это этап технологического цикла товародвижения от выпуска готовой продукции до потребления или утилизации, цель которого - обеспечение стабильности исходных свойств или их изменение с минимальными потерями.
22868. Виды и формы товарной информации. Требования к товарной информации. Средства информации 23.39 KB
  Первичными источниками товарной информации и одновременно исполнителями услуг по информированию продавцов и/или потребителей о продаваемых товарах являются производители
22869. Иммунитет, факторы его формирующие. Общее представление об иммунной системе и её работе 69 KB
  Иммунитет: определение понятия. Виды иммунитета. Факторы риска иммунитета.
22870. Экологические аспекты здоровья и перспективы выживания человека 47 KB
  Лимитирующими факторами выживания человеческого общества являются ресурсы. Ресурсы – то что мы получаем из окружающей среды для удовлетворения наших потребностей. Они подразделяются на несколько категорий: Невозобновимые – исчерпаемые ресурсы такие как ископаемое топливо которое не может быть рециркулированно или использовано повторно Потенциально возобновимые леса луга животные вода воздух плодородие почвы. Вечные ресурсы – фактически не используемые ресурсы солнечной энергии энергии ветра.
22871. Инфекционные заболевания 39 KB
  после заражения до начала заболевания проходит скрытый период инкубационный 17дн. на часть возбудителей после заболевания формируется активно приобретённый иммунитет корь ветрянка. вши Восприимчивость организма Возбудители: вирусымикробы которые в геноме имеют 1 цепочку ДНК и РНК; Заболевания: грипп простуда полиомелит ВИЧинфекция лихорадка Эбола краснуха корь ветряная оспа.
22872. Определение и терминология СПИДа и ВИЧ 212.5 KB
  Инфекция вызываемая вирусом иммунногодефицита человека инфекция ВИЧ новое заболевание передаваемое преимущественно половым путем. ВИЧ – медленно прогрессирующее инфекционное заболевание. Это стадия дает наибольшие возможности для распознавания инфекции ВИЧ заражение ВИЧ поражает иммунную систему в результате чего организм становиться высоко восприимчив к инфекциям и опухолям которые в конечном итоге приводят к гибели больного и история учения об этой инфекции начинается с изучения ее финала.