87127

Пути утилизации аммиака в организме

Лекция

Медицина и ветеринария

Образование мочевины орнитиновый цикл имеет большое значение для сохранения здоровья. Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Русский

2015-04-17

95.02 KB

7 чел.

Тема22. Пути утилизации аммиака в организме.

Актуальность темы

Результатом процессов дезаминирования и катаболизма аминокислот, нуклеотидов, биогенных аминов является образование аммиака. Кроме того, большое количество аммиака образуется в кишечнике при гниении белков, а также в скелетных мышцах при усиленной физической нагрузке. Аммиак - токсичное вещество, поэтому в организме существуют специальные пути его детоксикации.

Наибольшую роль в процессе обезвреживания аммиака играет печень, в которой аммиак превращается в нетоксичную мочевину. Образование мочевины (орнитиновый цикл) имеет большое значение для сохранения здоровья.

Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Цель занятия:

 уметь характеризовать основные пути образования и обезвреживания аммиака в организме;

 усвоить методы определения мочевины в биологических жидкостях, уметь интерпретировать полученные данные.

Конкретные цели:

 Трактовать метаболические закономерности образования и обезвреживания аммиака, циркуляторного транспорта аммиака, биосинтеза мочевины.

 Охарактеризовать химические превращения в орнитиновом цикле.

 Анализировать изменения в системах транспорта и обезвреживания аммиака при генетических аномалиях ферментов его метаболизма.

 Количественно определять мочевину в биологических жидкостях и интерпретировать полученные результаты.

Теоретические вопросы

1. Основные пути и источники образования аммиака в организме, причины и проявления

его токсичности.

2. Важнейшие механизмы обезвреживания аммиака:

• восстановительное аминирования а-кетоглутарата;

• образование амидов дикарбоновых кислот;

• образование аммонийных солей в норках;

• образование мочевины в печени.

3. Циркуляторный транспорт аммиака. Роль аланина в транспорте азота аминокислот для синтеза мочевины.

4. Особенности обезвреживания аммиака в нервной ткани.

5. Биосинтез мочевины:

• локализация процесса,

• последовательность реакций;

• биологическая роль,

• регуляция.

6. Взаимосвязь орнитинового цикла сечовиноутворення с ЦТК и Трансаминирование.

7. Генетические аномалии ферментов цикла образования мочевины. Гипераммониемии.

Практическая работа

Опыт 1. Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче по реакции с диацетилмонооксимом.

Принцип метода: Мочевина в кислой среде образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и трехвалентного железа  комплексное соединение красного цвета, оптическая плотность которой при зеленом светофильтре (500 - 560 нм) пропорциональна концентрации мочевины.

 

 

Материальное обеспечение: раствор трихлорацетатнои кислоты (ТХУ) (100 г / л), раствор мочевины (7 ммоль / л - 42г / 100 мл), цветной реактив - до 30 мл рабочего раствора железа хлорида (основной раствор - 5 г железа хлорида доводят до 100 мл водой и подкисляют добавлением 1 мл серной кислоты конц.; из основного раствора готовят рабочий 1 мл основного раствора железа хлорида доводят до 100 мл водой, добавляют 8 мл конц. серной кислоты и 1 мл 85% ортофосфорной кислоты; хранят 2 недели в темной посуде) добавляют 20 мл воды; 1 мл раствора диацетилмонооксиму (25 г / л, водный стабильный раствор) и 0,25 мл раствора тиосемикарбазида (2,5 г / л водный раствор стабилен при хранении в темной посуде при комнатной температуре); спектрофотометр; водяная баня, нагретая до температуры 100 С; сыворотка крови, суточная моча профильтрованная, разведенная физиологическим раствором натрия хлорида или дистиллированной водой 1: 50 или 1: 100 Цветной раствор готовят каждый раз перед использованием. Образцы: сыворотка (плазма) крови липемична или гемолизированных; цельная кровь (плазма).

Ход работы. Ход определения проводят по таблице:

Реактив

Проба

опытная

стандартная

контрольная

Сыворотка крови

0,02 мл

-

-

Эталонный раствор мочевины (7 ммоль/л.)

-

0,02 мл

-

Н2О

-

-

0,02 мл

Раствор диацетилмонооксима (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Раствор тиосемидкарбазида (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Пробирки закрывают алюминиевой фольгой, содержимое пробирок перемешивают и кипятят на водяной бане ровно 10 мин. Одновременно обрабатывают исследовательскую, стандартную и контрольную пробы. Затем пробирки быстро охлаждают под струей холодной воды. Колориметрують исследовательскую пробу и стандартную против контроля при длине волны 530-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение оптической плотности следует проводить в течение не более 15 мин после охлаждения.

Если после нагрева раствор в первой пробирке мутный, то его центрифугируют в течение 5 мин или депротеинують раствором трихлоруксусной кислоты.

Расчет. Концентрацию мочевины рассчитывают по формуле

                                             Едос

                                С =                        · 16,64 ммоль/л,

                                               Еет   

где - С - концентрация мочевины;

       Едос - оптическая плотность опытной пробы;

              Еет    - оптическая плотность эталонной пробы.

Примечания:

1 При содержании мочевины более 25 ммоль / л пробу нужно развести дистиллированной водой и повторить анализ. Результат умножить на разведение.

2 Гемолитические и липемични сыворотки депротеинують. Для этого 0,1 мл сыворотки смешивают с 0,9 мл раствором трихлоруксусной кислоты и центрифугируют 5 мин. Так же обрабатывают эталон. Для анализа отбирают исследования так же, как для сыворотки без депротеинування. Этим методом можно исследовать и кровь.

Объяснить полученный результат. Сделать вывод.

Значение для фармации и клиники. Синтез мочевины происходит в печени (цитозоль и митохондрии), главным образом, из аммиака, который образуется при дезаминировании аминокислот, распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. За сутки с мочой здорового человека выделяется 20 - 35 г (или 333 - 583 ммоль) мочевины. В норме содержание мочевины в сыворотке крови составляет 3,3 - 8,3 ммоль / л.

Увеличение содержания мочевины в сыворотке крови является одной из главных признаков нарушения выделительной функции почек. Кроме того, рост уровня мочевины в сыворотке крови может иметь внепочечным происхождения: потеря организмом жидкости (рвота, понос, обезвоживание), усиленный распад белков (острая жировая дистрофия печени). Уменьшение содержания мочевины может наблюдаться при заболеваниях печени (паренхиматозная желтуха, цирроз печени) вследствие нарушения его синтеза в этом органе.

Повышенное содержание мочевины в моче наблюдается при дефиците белка в пище, злокачественной анемии, лихорадке, интенсивном распаде белков в организме, после приема салицилатов, при отравлении фосфором. Пониженное содержание мочевины наблюдается при циррозе печени, паренхиматозной желтухи, нефрите, ацидозе, уремии.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

8989. Социальное и гуманитарное как методологическая проблема обществознания 36.5 KB
  Социальное и гуманитарное как методологическая проблема обществознания Социально-исторические изменения в обществе, ставшие реальностью сегодняшнего дня, требуют своего философского осмысления и нуждаются в разработке новых методов описания и анализ...
8990. Рефлексия как методология в социально-гуманитарном познании 53 KB
  Рефлексия как методология в социально-гуманитарном познании Методология - это область деятельности, функцией которой является создание и совершенствование интеллектуальных средств организации рефлексивных процессов. Поскольку осознанное отношение к ...
8991. Этические проблемы современной российской науки 54.5 KB
  Этические проблемы современной российской науки Социальное поведение регулируется правом и этикой. Право определяет однозначные общественные отношения, в то время как этика служит вектором поведения в неоднозначных, противоречивых ситуациях, н...
8992. Общие проблемы философии науки 168.5 KB
  Общие проблемы философии науки Вопрос № 13: Идеалы и нормы исследования, их социокультурная размерность и роль в научной деятельности. Ответ на вопрос: Научная деятельность, как и любая другая, руководствуется, во-первых, вполне определенным...
8993. Лекции по философии. Соотношение философии и науки по предмету 262.48 KB
  Лекция № 1. Предмет философии. Основная проблема: соотношение философии и науки по предмету. Цель: определить предмет философии как отношение человека к миру, так что аспекты этого отношения (онтологический, гносеологический и аксиологический) опред...
8994. Определение места философии в жизни человека 362.5 KB
  Определение места философии в жизни человека. Основная часть. Хайдеггер М. Основные понятия метафизики. Мамардашвили М. Как я понимаю философию. Соловьев Вл. Исторические дела философии. Бердяев Н.А. Философия как творческий акт. Приложение. Соловье...
8995. Философия античности. Природа души и ее свойства. Мир идеей и его познание 319 KB
  Философия античности. Основная часть. Платон: Природа души и ее свойства. Мир идеей и его познание. Теоретическое знание и философское познание. Философия как стремление к мудрости. Аристотель: О философии. О началах и причинах вещей. Материя и движ...
8996. Философия Средневековья. Теодицея: причины возникновения зла в мире 263 KB
  Философия Средневековья. Основная часть. О философии. Поиск Бога и доказательство Его бытия. Теодицея: причины возникновения зла в мире. Теория познания: вера и разум. Приложение. Библия: Первая книга Моисеева. Бытие. Время и вечность. О сущем и сущ...
8997. Философия Нового времени и Просвещения. Научное познание: методология рационализма 140.5 KB
  Философия Нового времени и Просвещения. Основная часть. Новоевропейская картина мира. Рене Декарт: Научное познание: методология рационализма. Интеллектуальная интуиция. Френсис Бэкон: Цель познания. Экспериментальный метод научного познания. Дж. Ло...