87127

Пути утилизации аммиака в организме

Лекция

Медицина и ветеринария

Образование мочевины орнитиновый цикл имеет большое значение для сохранения здоровья. Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Русский

2015-04-17

95.02 KB

7 чел.

Тема22. Пути утилизации аммиака в организме.

Актуальность темы

Результатом процессов дезаминирования и катаболизма аминокислот, нуклеотидов, биогенных аминов является образование аммиака. Кроме того, большое количество аммиака образуется в кишечнике при гниении белков, а также в скелетных мышцах при усиленной физической нагрузке. Аммиак - токсичное вещество, поэтому в организме существуют специальные пути его детоксикации.

Наибольшую роль в процессе обезвреживания аммиака играет печень, в которой аммиак превращается в нетоксичную мочевину. Образование мочевины (орнитиновый цикл) имеет большое значение для сохранения здоровья.

Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Цель занятия:

 уметь характеризовать основные пути образования и обезвреживания аммиака в организме;

 усвоить методы определения мочевины в биологических жидкостях, уметь интерпретировать полученные данные.

Конкретные цели:

 Трактовать метаболические закономерности образования и обезвреживания аммиака, циркуляторного транспорта аммиака, биосинтеза мочевины.

 Охарактеризовать химические превращения в орнитиновом цикле.

 Анализировать изменения в системах транспорта и обезвреживания аммиака при генетических аномалиях ферментов его метаболизма.

 Количественно определять мочевину в биологических жидкостях и интерпретировать полученные результаты.

Теоретические вопросы

1. Основные пути и источники образования аммиака в организме, причины и проявления

его токсичности.

2. Важнейшие механизмы обезвреживания аммиака:

• восстановительное аминирования а-кетоглутарата;

• образование амидов дикарбоновых кислот;

• образование аммонийных солей в норках;

• образование мочевины в печени.

3. Циркуляторный транспорт аммиака. Роль аланина в транспорте азота аминокислот для синтеза мочевины.

4. Особенности обезвреживания аммиака в нервной ткани.

5. Биосинтез мочевины:

• локализация процесса,

• последовательность реакций;

• биологическая роль,

• регуляция.

6. Взаимосвязь орнитинового цикла сечовиноутворення с ЦТК и Трансаминирование.

7. Генетические аномалии ферментов цикла образования мочевины. Гипераммониемии.

Практическая работа

Опыт 1. Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче по реакции с диацетилмонооксимом.

Принцип метода: Мочевина в кислой среде образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и трехвалентного железа  комплексное соединение красного цвета, оптическая плотность которой при зеленом светофильтре (500 - 560 нм) пропорциональна концентрации мочевины.

 

 

Материальное обеспечение: раствор трихлорацетатнои кислоты (ТХУ) (100 г / л), раствор мочевины (7 ммоль / л - 42г / 100 мл), цветной реактив - до 30 мл рабочего раствора железа хлорида (основной раствор - 5 г железа хлорида доводят до 100 мл водой и подкисляют добавлением 1 мл серной кислоты конц.; из основного раствора готовят рабочий 1 мл основного раствора железа хлорида доводят до 100 мл водой, добавляют 8 мл конц. серной кислоты и 1 мл 85% ортофосфорной кислоты; хранят 2 недели в темной посуде) добавляют 20 мл воды; 1 мл раствора диацетилмонооксиму (25 г / л, водный стабильный раствор) и 0,25 мл раствора тиосемикарбазида (2,5 г / л водный раствор стабилен при хранении в темной посуде при комнатной температуре); спектрофотометр; водяная баня, нагретая до температуры 100 С; сыворотка крови, суточная моча профильтрованная, разведенная физиологическим раствором натрия хлорида или дистиллированной водой 1: 50 или 1: 100 Цветной раствор готовят каждый раз перед использованием. Образцы: сыворотка (плазма) крови липемична или гемолизированных; цельная кровь (плазма).

Ход работы. Ход определения проводят по таблице:

Реактив

Проба

опытная

стандартная

контрольная

Сыворотка крови

0,02 мл

-

-

Эталонный раствор мочевины (7 ммоль/л.)

-

0,02 мл

-

Н2О

-

-

0,02 мл

Раствор диацетилмонооксима (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Раствор тиосемидкарбазида (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Пробирки закрывают алюминиевой фольгой, содержимое пробирок перемешивают и кипятят на водяной бане ровно 10 мин. Одновременно обрабатывают исследовательскую, стандартную и контрольную пробы. Затем пробирки быстро охлаждают под струей холодной воды. Колориметрують исследовательскую пробу и стандартную против контроля при длине волны 530-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение оптической плотности следует проводить в течение не более 15 мин после охлаждения.

Если после нагрева раствор в первой пробирке мутный, то его центрифугируют в течение 5 мин или депротеинують раствором трихлоруксусной кислоты.

Расчет. Концентрацию мочевины рассчитывают по формуле

                                             Едос

                                С =                        · 16,64 ммоль/л,

                                               Еет   

где - С - концентрация мочевины;

       Едос - оптическая плотность опытной пробы;

              Еет    - оптическая плотность эталонной пробы.

Примечания:

1 При содержании мочевины более 25 ммоль / л пробу нужно развести дистиллированной водой и повторить анализ. Результат умножить на разведение.

2 Гемолитические и липемични сыворотки депротеинують. Для этого 0,1 мл сыворотки смешивают с 0,9 мл раствором трихлоруксусной кислоты и центрифугируют 5 мин. Так же обрабатывают эталон. Для анализа отбирают исследования так же, как для сыворотки без депротеинування. Этим методом можно исследовать и кровь.

Объяснить полученный результат. Сделать вывод.

Значение для фармации и клиники. Синтез мочевины происходит в печени (цитозоль и митохондрии), главным образом, из аммиака, который образуется при дезаминировании аминокислот, распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. За сутки с мочой здорового человека выделяется 20 - 35 г (или 333 - 583 ммоль) мочевины. В норме содержание мочевины в сыворотке крови составляет 3,3 - 8,3 ммоль / л.

Увеличение содержания мочевины в сыворотке крови является одной из главных признаков нарушения выделительной функции почек. Кроме того, рост уровня мочевины в сыворотке крови может иметь внепочечным происхождения: потеря организмом жидкости (рвота, понос, обезвоживание), усиленный распад белков (острая жировая дистрофия печени). Уменьшение содержания мочевины может наблюдаться при заболеваниях печени (паренхиматозная желтуха, цирроз печени) вследствие нарушения его синтеза в этом органе.

Повышенное содержание мочевины в моче наблюдается при дефиците белка в пище, злокачественной анемии, лихорадке, интенсивном распаде белков в организме, после приема салицилатов, при отравлении фосфором. Пониженное содержание мочевины наблюдается при циррозе печени, паренхиматозной желтухи, нефрите, ацидозе, уремии.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

83583. Поняття та принципи міжнародного повітряного права 32.8 KB
  Міжнародне повітряне право - це система міжнародно-правових норм, які регулюють відносини між суб\'єктами міжнародного права у зв\'язку з використанням повітряного простору та визначають його правовий режим.
83584. Міжнародна організація цивільної авіації 36.37 KB
  Міжнародна організація цивільної авіації ІКАО була створена відповідно до Конвенції про міжнародну цивільну авіацію 1944 р.: забезпечувати безпечний і впорядкований розвиток міжнародної цивільної авіації в усьому світі; заохочувати мистецтво конструювання й експлуатації повітряних суден у мирних цілях; заохочувати розвиток повітряних трас аеропортів і аеронавігаційних засобів для міжнародної цивільної авіації; задовольняти потреби народів світу у безпечному регулярному ефективному й економічному повітряному транспорті; запобігати...
83585. Правовий режим повітряного простору. Свобода повітря 37.43 KB
  Згідно з принципом свободи польотів у міжнародному повітряному просторі повітряні судна підпорядковуються в даній сфері юрисдикції держави прапору держави реєстрації Порядок реєстрації повітряних суден визначається внутрішнім правом. Держави зобов\'язані здійснювати контроль за відповідністю зареєстрованих в них повітряних суден вимогам безпеки польотів та за дотриманням ними міжнародних норм. Юрисдикція держави у власному повітряному просторі визначається її територіальним верховенством. Повітряний простір є частиною території держави.
83586. Боротьба з актами незаконного втручання у діяльність цивільної авіації 32.4 KB
  містить цілий ряд статей що відносяться до повітряного піратства під яким розуміють будьякий неправомірний акт насильства затримання що здійснюється в особистих цілях екіпажем або пасажирами приватного літального апарату. У міжнародному просторі урядові судна будьякої держави можуть захопити піратський літальний апарат заарештувати осіб що захопили його та віддати суду своєї держави. Будьяка держава зобовязана або судити або видавати осіб що скоїли їх.
83587. Поняття і принципи міжнародного космічного права 35.11 KB
  Його основними джерелами є: Договір про принципи діяльності держав з дослідження та використання космічного простору включаючи Місяць та інші небесні тіла 1967 р. Угода про діяльність держав на Місяці та інших небесних тілах 1979 р. Принципи міжнародного космічного права закріплені у Договорі про принципи діяльності держав з дослідження та використання космічного простору включаючи Місяць та інші небесні тіла 1967 р. До них відносяться: дослідження та використання космосу на благо всього людства; рівне право всіх держав на дослідження та...
83588. Правовий режим космічного простору і небесних тіл 35.9 KB
  Розмежування повітряного простору держав на який поширюється їх суверенітет та відкритого космічного простору проходить на висоті 100110 км над рівнем Світового океану. Основоположною особливістю сучасного правового статусу космічного простору та небесних тіл є їх міжнародноправова кваліфікація як надбання всього людства. встановлює що ніяка частина космічного простору включаючи небесні тіла не підлягає національному привласненню ані шляхом проголошення над ними суверенітету ані шляхом використання або окупації; ані будьякими...
83589. Правовий режим космічних обєктів і екіпажів 37.05 KB
  Згідно з Конвенцією про реєстрацію об\'єктів що запускаються В космічний простір 1975 р. держава що здійснює такий запуск реєструє космічний об\'єкт у національному реєстрі. Кожна запускаюча держава представляє Генеральному секретарю ООН у найкоротший строк необхідну інформацію про кожний космічний об\'єкт занесений в її реєстр.
83590. Відповідальність у міжнародному космічному праві 35.62 KB
  Держави несуть міжнародну відповідальність за національну діяльність у космічному просторі включаючи Місяць та інші небесні тіла незалежно від того чи здійснюється вона урядовими органами або неурядовими юридичними особами. У випадку діяльності в космічному просторі включаючи Місяць та інші небесні тіла міжнародної організації відповідальність за виконання Договору про космос несуть разом з міжнародною організацією також і держави що беруть у ній участь. Держава що здійснює або організує запуск об\\\'єкта в космос а також кожна...
83591. Поняття і принципи міжнародного економічного права. Джерела міжнародного економічного права 37.61 KB
  Сучасна практика свідчить, що основну частину МЕП складають норми, що регулюють міждержавні економічні відносини. Так, норми, спрямовані на регулювання правовідносин за участю фізичних та юридичних осіб, переважно регулюють відповідні...