87127

Пути утилизации аммиака в организме

Лекция

Медицина и ветеринария

Образование мочевины орнитиновый цикл имеет большое значение для сохранения здоровья. Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Русский

2015-04-17

95.02 KB

6 чел.

Тема22. Пути утилизации аммиака в организме.

Актуальность темы

Результатом процессов дезаминирования и катаболизма аминокислот, нуклеотидов, биогенных аминов является образование аммиака. Кроме того, большое количество аммиака образуется в кишечнике при гниении белков, а также в скелетных мышцах при усиленной физической нагрузке. Аммиак - токсичное вещество, поэтому в организме существуют специальные пути его детоксикации.

Наибольшую роль в процессе обезвреживания аммиака играет печень, в которой аммиак превращается в нетоксичную мочевину. Образование мочевины (орнитиновый цикл) имеет большое значение для сохранения здоровья.

Для будущих фармацевтов знания по обмену аммиака и образования мочевины в качестве основного продукта его обезвреживания важны для понимания причин и последствий гипераммониемии.

Цель занятия:

 уметь характеризовать основные пути образования и обезвреживания аммиака в организме;

 усвоить методы определения мочевины в биологических жидкостях, уметь интерпретировать полученные данные.

Конкретные цели:

 Трактовать метаболические закономерности образования и обезвреживания аммиака, циркуляторного транспорта аммиака, биосинтеза мочевины.

 Охарактеризовать химические превращения в орнитиновом цикле.

 Анализировать изменения в системах транспорта и обезвреживания аммиака при генетических аномалиях ферментов его метаболизма.

 Количественно определять мочевину в биологических жидкостях и интерпретировать полученные результаты.

Теоретические вопросы

1. Основные пути и источники образования аммиака в организме, причины и проявления

его токсичности.

2. Важнейшие механизмы обезвреживания аммиака:

• восстановительное аминирования а-кетоглутарата;

• образование амидов дикарбоновых кислот;

• образование аммонийных солей в норках;

• образование мочевины в печени.

3. Циркуляторный транспорт аммиака. Роль аланина в транспорте азота аминокислот для синтеза мочевины.

4. Особенности обезвреживания аммиака в нервной ткани.

5. Биосинтез мочевины:

• локализация процесса,

• последовательность реакций;

• биологическая роль,

• регуляция.

6. Взаимосвязь орнитинового цикла сечовиноутворення с ЦТК и Трансаминирование.

7. Генетические аномалии ферментов цикла образования мочевины. Гипераммониемии.

Практическая работа

Опыт 1. Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче по реакции с диацетилмонооксимом.

Принцип метода: Мочевина в кислой среде образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и трехвалентного железа  комплексное соединение красного цвета, оптическая плотность которой при зеленом светофильтре (500 - 560 нм) пропорциональна концентрации мочевины.

 

 

Материальное обеспечение: раствор трихлорацетатнои кислоты (ТХУ) (100 г / л), раствор мочевины (7 ммоль / л - 42г / 100 мл), цветной реактив - до 30 мл рабочего раствора железа хлорида (основной раствор - 5 г железа хлорида доводят до 100 мл водой и подкисляют добавлением 1 мл серной кислоты конц.; из основного раствора готовят рабочий 1 мл основного раствора железа хлорида доводят до 100 мл водой, добавляют 8 мл конц. серной кислоты и 1 мл 85% ортофосфорной кислоты; хранят 2 недели в темной посуде) добавляют 20 мл воды; 1 мл раствора диацетилмонооксиму (25 г / л, водный стабильный раствор) и 0,25 мл раствора тиосемикарбазида (2,5 г / л водный раствор стабилен при хранении в темной посуде при комнатной температуре); спектрофотометр; водяная баня, нагретая до температуры 100 С; сыворотка крови, суточная моча профильтрованная, разведенная физиологическим раствором натрия хлорида или дистиллированной водой 1: 50 или 1: 100 Цветной раствор готовят каждый раз перед использованием. Образцы: сыворотка (плазма) крови липемична или гемолизированных; цельная кровь (плазма).

Ход работы. Ход определения проводят по таблице:

Реактив

Проба

опытная

стандартная

контрольная

Сыворотка крови

0,02 мл

-

-

Эталонный раствор мочевины (7 ммоль/л.)

-

0,02 мл

-

Н2О

-

-

0,02 мл

Раствор диацетилмонооксима (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Раствор тиосемидкарбазида (2,5 г/л)

2,00 мл

2,00 мл

2,00 мл

Пробирки закрывают алюминиевой фольгой, содержимое пробирок перемешивают и кипятят на водяной бане ровно 10 мин. Одновременно обрабатывают исследовательскую, стандартную и контрольную пробы. Затем пробирки быстро охлаждают под струей холодной воды. Колориметрують исследовательскую пробу и стандартную против контроля при длине волны 530-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение оптической плотности следует проводить в течение не более 15 мин после охлаждения.

Если после нагрева раствор в первой пробирке мутный, то его центрифугируют в течение 5 мин или депротеинують раствором трихлоруксусной кислоты.

Расчет. Концентрацию мочевины рассчитывают по формуле

                                             Едос

                                С =                        · 16,64 ммоль/л,

                                               Еет   

где - С - концентрация мочевины;

       Едос - оптическая плотность опытной пробы;

              Еет    - оптическая плотность эталонной пробы.

Примечания:

1 При содержании мочевины более 25 ммоль / л пробу нужно развести дистиллированной водой и повторить анализ. Результат умножить на разведение.

2 Гемолитические и липемични сыворотки депротеинують. Для этого 0,1 мл сыворотки смешивают с 0,9 мл раствором трихлоруксусной кислоты и центрифугируют 5 мин. Так же обрабатывают эталон. Для анализа отбирают исследования так же, как для сыворотки без депротеинування. Этим методом можно исследовать и кровь.

Объяснить полученный результат. Сделать вывод.

Значение для фармации и клиники. Синтез мочевины происходит в печени (цитозоль и митохондрии), главным образом, из аммиака, который образуется при дезаминировании аминокислот, распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. За сутки с мочой здорового человека выделяется 20 - 35 г (или 333 - 583 ммоль) мочевины. В норме содержание мочевины в сыворотке крови составляет 3,3 - 8,3 ммоль / л.

Увеличение содержания мочевины в сыворотке крови является одной из главных признаков нарушения выделительной функции почек. Кроме того, рост уровня мочевины в сыворотке крови может иметь внепочечным происхождения: потеря организмом жидкости (рвота, понос, обезвоживание), усиленный распад белков (острая жировая дистрофия печени). Уменьшение содержания мочевины может наблюдаться при заболеваниях печени (паренхиматозная желтуха, цирроз печени) вследствие нарушения его синтеза в этом органе.

Повышенное содержание мочевины в моче наблюдается при дефиците белка в пище, злокачественной анемии, лихорадке, интенсивном распаде белков в организме, после приема салицилатов, при отравлении фосфором. Пониженное содержание мочевины наблюдается при циррозе печени, паренхиматозной желтухи, нефрите, ацидозе, уремии.


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

66482. Экономический анализ эффективности использования трудовых ресурсов в ФГБУ «Средневолжрыбвод» 5.79 MB
  Расчет заработной платы и учет расчетов с персоналом по оплате труда в учреждении является одним из самых трудоемких, объемных и ответственных участков работы. Сложность проведения подсчетов заключается в их персонифицированном характере - заработок считается для каждого сотрудника...
66483. Проект ЯЭУ ледокола с эффективной мощностью (мощность на винтах) 40МВт 4.19 MB
  Произведен расчет тепловой схемы установки оборудования I контура. Произведен тепловой гидравлический и прочностной расчеты ПГ расчет ГЦН I контура. Техническое освидетельствование один раз в год; оборудование реакторной установки должно охлаждаться водой третьего контура с температурой не выше 40оС...
66485. Мероприятия по снижению затрат в области энергоснабжения здания конторы ООО «Агрофирмы Тукса» 1.78 MB
  Граница балансовой принадлежности тепловых сетей по первому фланцу до запорной арматуры со стороны тепловой сети на элеваторном узле. Расчётные расходы теплоносителя вода 9060 определяются на основании проекта путём деления тепловой нагрузки...
66486. Исследование влияния дыхательных упражнений по методу Бутейко на процесс оздоровления школьников 116 KB
  Лечебная физкультура известна человечеству с давних времен. Широко применялась она в Египте, Риме, использовалась также некоторыми северными народами, в том числе и среди народов, населявших территорию нашей страны. Однако обоснованное применение физкультуры при инфаркте миокарда появилось сравнительно недавно.
66487. Разработка компьютерной программы при оформлении документации очного отделения - «Учебная часть РПТ» 1.54 MB
  Применение ЭВМ в учебном процессе является естественным продолжением многолетнего процесса внедрения в обучение технических средств. Обладающие высоким быстродействием, большой памятью, способностью перерабатывать информацию, поступающую одновременно от многих пользователей...
66489. Психокоррекция энуреза у детей дошкольного и младшего школьного возраста 298 KB
  В младшем школьном возрасте проблема энуреза напрямую соприкасается с проблемой адаптации к началу обучения в школе и закономерно влияет на успешность ребенка в учебной деятельности, в овладении новыми способами межличностных коммуникаций со сверстниками.
66490. СТРАТЕГІЯ УПРАВЛІННЯ АКТИВАМИ ТОРГІВЕЛЬНОГО ПІДПРИЄМСТВА 1.65 MB
  Мета роботи - розробка стратегії управління обіговими активами підприємства. Методика дослідження: методи фінансового аналізу, економіко-статистичні та економетричні методи. Одержані насідки та їх новизна: обгрунтування тактики стратегії управління активами підприємства.