91918

Метаболические показатели при пневмониях

Дипломная

Медицина и ветеринария

Данная исследовательская работа была проведена на базе ЛИС (лабораторно-информационная система) в клинико-диагностической лаборатории Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Специализированной клинической инфекционной больницы» (ГБУЗ «СКИБ». Материалом исследования являлась сыворотка крови 25 людей больных пневмонией в стадии обострения или ремиссии.

Русский

2015-07-24

182 KB

2 чел.

Министерство образования и науки российской Федерации

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«Кубанский государственный университет»

(ФГБОУ ВПО «КубГУ»)

Кафедра биохимии и физиологии

Допустить к защите в гак

Заведующий кафедрой

Канд. биол. наук, доцент

__________________ В.В. Хаблюк

    (подпись)                   

__________________2013 г.

Выпускная квалификационная работа

Бакалавра

метаболические показатели при пневмониях

Работу выполнил _____________________________________  Д. М. Соседко

                                                         (подпись, дата)                                  

Факультет Биологический

Направление Биология 020200.62

Научный руководитель

доцент, канд. биол. наук ________________________________ В.В. Хаблюк

                                                                          (подпись, дата)                                 

Нормоконтролер

зав. каф.,

канд. биол. наук, доцент ________________________________ Н.Н. Улитина

                                                                            (подпись, дата)                             

Краснодар 2013

Реферат

Дипломная работа изложена на 30 страницах машинописного текста и содержит шесть таблиц. Работа  состоит из введения, трех глав, выводов и списка литературы включающего 28  источников.

Ключевые  слова: пневмония, клинический,  биохимический анализ крови, белки острой фазы, иммунный статус.

Данная исследовательская работа была проведена на базе ЛИС (лабораторно-информационная система) в клинико-диагностической  лаборатории Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Специализированной клинической инфекционной больницы» (ГБУЗ «СКИБ».  Материалом исследования являлась сыворотка крови  25 людей больных пневмонией в стадии обострения или ремиссии.

Среди показателей клинического анализа можно отметить: повышение СОЭ в три раза, повышение уровня лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево.  Из биохимических показателей  можно отметить увеличение уровня СРБ до 40,3 мг/л, увеличение уровня фибриногена до 7,7 г/л,  повышение в два раза активности ЛДГ.

Среди иммунологических показателей отмечено  увеличение количества В-лимфоцитов в три раза. У пяти больных было отмечено повышение уровня Ig G, IgM. У десяти больных  отмечено снижение  уровня С3 комплемента, что может быть одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.


СОДЕРЖАНИЕ

Введение…..………………………………………………….…………………5

1 Аналитический обзор литературы…………………………….……………7

1.1Белковый обмен……………………………………………………………..8

1.2 Исследования показателей белкового обмена……………………………8

1.3 Исследования липидного и углеводного обменов………………………9

1.4 Характеристика пневмонии……………………………………………….10

2  Материал и методы исследования………………………………………….13

2.1 Материал исследования…………………………………………………..13

2.2 Методы исследования…………………………………………………….14

2.2.1 Клинический анализ крови……………………………………………..15

2.2.2 Биохимический анализ крови…………………………………………..17

2.2.3 Иммунологические исследования……………………………………..19

2.3 Статистическая обработка данных………………………………………21

3 Метаболические показатели при пневмониях……………………………..22

3.1 Изменение показателей белкового обмена при пневмонии…………….22

3.2 Определение иммунного статуса………………..……………………….24

Заключение…….………………….……………….………………………….26

Библиографический список ………..……….……………………………….28


ОПРЕДЕЛЕНИЯ, ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

СОЭ –  скорость оседания эритроцитов

СРБ –  С-реактивный белок, белок острой фазы

ЛДГ –  лактатдегидрогеназа

IgG –  иммуноглобулин  G

IgM –  иммуноглобулин  M

IgA –  иммуноглобулин  A

CD3 –  Т-лимфоциты

CD4 –  Т-хелперы

CD8  –  цитотоксические Т-лимфоциты

CD16 –  NK-клетки

CD19 –  В-лимфоциты


Введение

Пневмония относится к наиболее распространенным заболеваниям у человека и является одной из ведущих причин смерти от инфекционных болезней.  Согласно официальной статистике (Центральный научно-исследовательский институт организации и информатизации здравоохранения Минздравсоцразвития РФ), на 2010 г. в РФ было зарегистрировано 449673 случая заболевания пневмонией, что составило у лиц в возрасте больше восемнадцати лет – 3,88 ‰. Наиболее высокая заболеваемость пневмонией среди взрослых отмечена в Сибирском и Дальневосточном федеральных округах (4,31  и 4,40‰  соответственно),  наименьшая – в Южном федеральном округе (3,09‰).  Очевидно, однако, что эти цифры не отражают истинной заболеваемости пневмонией в России,  которая согласно расчетам достигает 14–15‰, а общее число больных ежегодно превышает 1,5 млн. человек  [Блюменталь, 2011].

Пневмония сопровождается развитием дистрофических процессов не только в тканях легких, но и форменных элементах крови, в частности нейтрофильных гранулоцитах. Легочная патология связана с увеличением в крови продуктов эндотоксикации, обусловленных метаболическими нарушениями на клеточном уровне. Эндотоксикоз - действие токсинов бактериального происхождения и влиянием активных эндогенных аминов, освобождающихся из поврежденных клеток и тканей. Своевременное и регулярное определение показателей в крови позволяет контролировать состояние организма, как в норме, так и при патологии.

Цель работы – определение относительной диагностической и прогностической ценности клинико-биохимических показателей пи пневмониях.

Задачи:

1.Изучение метаболических показателей клинического и биохимического анализов при пневмониях.

2.Изучить состояние иммунного статуса у людей больных пневмонией.

В связи с этим исследование динамики клинико-биохимических и иммунологических показателей при пневмониях представляется нам весьма актуальным, поскольку, несмотря на постоянно растущее количество новых антибактериальных препаратов, заболеваемость пневмонией и летальность от нее весьма высоки.


1 Аналитический обзор литературы

Метаболизм – это ряд химических реакций необходимых для поддержания жизни. Метаболические процессы позволяют организму  расти и размножаться, сохранять свои структуры и отвечать на воздействия окружающей среды.

Легкие не только обеспечивают газообмен, но и выполняют важные метаболические функции. Одна из них состоит в образовании фосфолипидов, например дипальмитоилфосфатидилхолина, входящего в состав сурфактанта. Важную роль играет также синтез белков, так как структурная основа легких образована коллагеном и эластином. Известно, что при патологии в легких из лейкоцитов или макрофагов выбрасываются протеазы, вызывающие распад белков, в результате чего возникает эмфизема. Большое значение имеет также обмен углеводов, особенно выработка мукополисахаридов, входящих в состав бронхиальной слизи. 

В легких происходит обмен многих веществ, влияющих на сосуды. Только через эти органы проходит вся кровь, следовательно, они идеально подходят для превращений, циркулирующих в ней веществ. Именно в легких сосредоточена значительная часть всех сосудистых эндотелиальных клеток организма. 

Единственное известное нам вещество, активируемое в легочных сосудах ‒ ангиотензин I, полипептид, который превращается здесь в мощный сосудосуживающий агент ‒ ангиотензин II, примерно в 50 раз более активный, чем его предшественник. При прохождении через сосуды легких ангиотензин II не изменяется. Это превращение катализируется так называемым ангиотензинконвертирующим ферментом, локализованным в небольших углублениях  на поверхности эндотелиальных клеток капилляров.

Имеются также данные о том, что легкие играют определенную роль в свертывании крови в нормальных и патологических условиях. Так, в их интерстиции присутствует большое количество тучных клеток, содержащих гепарин. Наконец, легкие могут вырабатывать особые иммуноглобулины, в частности, IgA, они выделяются в бронхиальную слизь и участвуют в борьбе с инфекцией. Значение некоторых метаболических процессов, происходящих в легких, пока неясно, однако совершенно очевидно, что эти органы, помимо функции газообмена, выполняют и другие важные задачи [Уэст,1988].

1.1 Белковый обмен

Белки – наиболее важные биологические вещества живых организмов . Они служат основным пластическим материалом, из которого строятся клетки, ткани и органы тела человека. Они выполняют ряд важнейших биологических функций: пластическая, ферментативная, защитная, транспортная, энергетическая. Вся совокупность обмена веществ в организме (дыхание, пищеварение, выделение) обеспечивается деятельностью ферментов, которые являются белками.

Поступающий с пищей из внешней среды белок служит пластической и энергетической целям. Пластическое значение белка состоит в восполнении и новообразовании различных структурных компонентов клетки. Энергетическое значение заключается в обеспечении организма энергией, образующейся при расщеплении белков.

В тканях постоянно протекают процессы распада белка с последующим выделением из организма неиспользованных продуктов белкового обмена и наряду с этим синтез белков. Таким образом, белки организма находятся в динамическом состоянии: из-за непрерывного процесса их разрушения и образования происходит обновление белков, скорость которого неодинакова для различных тканей. С наибольшей скоростью обновляются белки печени, слизистой оболочки кишечника, а также других внутренних органов и плазмы крови. Медленнее обновляются белки, входящие в состав клеток мозга, сердца, половых желез и еще медленнее – белки мышц, кожи и особенно опорных тканей (сухожилий, костей и хрящей).

1.2 Исследования показателей белкового обмена

Белки участвуют в процессах обмена веществ. По роли, выполняемой белками в организме можно выделить следующие группы:

  •  Белки, как компоненты клеток крови – эритроцитов, лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов. Белки входят в состав всех клеток организма и межтканевых структур, обеспечивают развитие организма за счет процессов биосинтеза.
  •  Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) – это белок-фермент. Ферментная функция, которой,  определяется участием в реакциях гликолиза.  Она катализирует превращение лактата в пируват и обратную реакцию.
  •  Защитная функция  белков состоит в образовании иммунных белков – антител (иммуноглобулины, cd-клетки). Белки способны связывать токсины и яды а также обеспечивать свертываемость крови (фибриноген). Также сюда можно отнести белки острой фазы – СОЭ, СРБ, серомукоид.
  •  Транспортная функция заключается в переносе кислорода и двуокиси углерода эритроцитным белком гемоглобином, а также в связывании и переносе некоторых ионов (железо, медь, водород), лекарственных веществ, токсинов.

1.3 Исследования липидного и углеводного обменов

Липидный обмен – это выработка и расщепление жиров (липидов) в организме. Расщепление жиров осуществляется в основном в печени и в жировой ткани и имеет сложную регуляцию. Липидный обмен в легких осуществляется при помощи больших альвеолярных клеток, захватывающих нейтральные жиры, фосфолипиды и холестерин. Накоплено много данных о том, что основной функцией больших альвеолярных клеток является продукция сурфактанта (поверхностно-активного вещества), обеспечивающего стабилизацию воздушных просветов альвеол и предотвращающего их слипание. Также он выполняет бактерицидную и иммуномодулирующую функции.

Углеводы участвуют во многих метаболических процессах, но прежде всего они являются основными поставщиками энергии. Однако неправильно сводить функцию углеводов только к энергетическому обеспечению процессов жизнедеятельности организма. Следует отметить и структурную роль углеводов. В комплексе с белками и липидами они входят в состав мембраны эритроцита, легочного сурфактанта. А также углеводы присутствуют в бронхиальной слизи, которая выполняет барьерную функцию и способна связывать и транспортировать микроорганизмы.

1.4 Характеристика пневмонии

Пневмония – острое инфекционное воспаление нижних дыхательных путей с обязательным вовлечением легочной ткани (альвеол, бронхов, бронхиол).

В настоящее время выделяют несколько разновидностей пневмоний:

1) Внебольничная пневмония – самый распространенный вид заболевания.

2) Нозокомиальная или госпитальная пневмония. К данной форме относят заболевание, развившееся при нахождении больного в стационаре более 72 часов. При этом при поступлении пациент не имел клинических проявлений пневмонии.

3) Аспирационная пневмония – возникает в результате попадания в дыхательные пути пищи, воды, инородных предметов.

4) Атипичная пневмония. Разновидность заболевания, вызываемая атипичной микрофлорой (хламидиями, микоплазмами, легионеллами и т.д.)

[Ковалева, Кулаков, 2004].

Выделяют также:

Очаговую пневмонию – она занимает небольшой очаг лёгкого (бронхопневмония – респираторные отделы плюс бронхи)

Сегментарную пневмонию – распространяется на один или несколько сегментов лёгкого.

Долевую пневмонию – захватывает долю лёгкого. Классическим примером долевой пневмонии является крупозная пневмония – преимущественно альвеолы и прилежащий участок плевры.

Сливную пневмонию – слияние из мелких очагов  более крупные.

Тотальную пневмонию – распространяется на всё лёгкое.

Кроме   того, пневмония   может  быть  односторонней,  если  поражено

только одно лёгкое, и двусторонней, если больны оба лёгких [Мавродий, 2009;Синопальников, Чучалин, 2010]. 

Пневмония может быть первичной, если она выступает как самостоятельное заболевание, и вторичной, если она развилась на фоне другой болезни, например, вторичная пневмония на фоне хронического бронхита.

Пневмония это, прежде всего, бактериальное заболевание. Основные возбудители пневмонии: пневмококк (Streptococcus pneumoniae), стафилококк (Staphylococcus aureus),  гемофильная палочка (Haemophilus influenzae) а также «атипичные» инфекции (Chlamydya pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumoniae).

Реже причиной острой пневмонии могут быть (Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter  и т.д.). Они чаще

встречаются у пациентов с тяжелыми сопутствующими заболеваниями, у

у  больных с ослабленной иммунной системой [Синопальников, Чучалин, 2010]. 

Пусковым фактором развития пневмонии могут быть различные вирусные инфекции. Они вызывают воспаление верхних дыхательных путей и обеспечивают «комфортные условия» для развития бактериальных возбудителей.

Возможны три пути проникновения в легкие возбудителей пневмоний: бронхогенный, гематогенный и лимфогенный.

Основные механизмы развития пневмонии:

1. Внедрение инфекции в легочную ткань чаще бронхогенным, реже – гематогенным или лимфогенным путем.

2. Снижение функции системы местной бронхопульмональной защиты.

3. Развитие под влиянием инфекции воспаления в альвеолах и распространение его через межальвеолярные поры на другие отделы легких.

4 Развитие сенсибилизации к инфекционным агентам, формирование иммунных комплексов, взаимодействие их с комплементом, выделение медиаторов воспаления.

5. Повышение агрегации тромбоцитов, нарушения в системе микроциркуляции.

6. Активация перекисного окисления липидов, выделение свободных радикалов, дестабилизирующих лизосомы и повреждающих легкие.

7. Нервно-трофические расстройства бронхов и легких.

Характер морфологических изменений в легких определяется типом возбудителя, реактивностью организма, сопутствующими заболеваниями. В анализе крови часто определяются гиперлейкоцитоз (более 10^9/л), нейтрофилез с палочкоядерным сдвигом, у 1/3 больных –  анэозинофилия, у всех значительно повышены СОЭ и содержание острофазовых белков крови.

Среди клинических показателей имеют значение общие признаки (слабость, вялость, адинамия, снижение аппетита, лихорадка, нарушенный уровень сознания).  Респираторные симптомы  (кашель, мокрота, одышка, боль при дыхании). Физикальные данные – изменение перкуторного звука, ослабленное или жесткое дыхание, хрипы, крепитация, гипотония, тахикардия [Григорьев, Гуркин, Добрянков, 2002].

Прогноз при острой пневмонии в наше время относительно благополучен, однако, знание основных диагностических критериев этого заболевания, ведущих принципов дифференциальной диагностики, ранних осложнений, а также лечебной тактики крайне необходимо врачам скорой помощи.

2 Материал и методы исследования

2.1 Материал исследования

Материалом клинико-биохимических исследований являлась сыворотка крови.  Всего было обследовано 25 человек  больных пневмонией.

Подготовка пациента к сдаче крови очень важна: кровь на исследование  наличия инфекций сдается натощак (в утренние часы или спустя 4–5 часов после последнего приема пищи днем или вечером, причем этот последний прием не должен быть обильным, а продукты с высоким содержанием жиров следует исключить из рациона и накануне сдачи анализа). Результаты исследований на наличие инфекций зависят от периода инфицирования и состояния иммунной системы, поэтому отрицательный результат полностью не исключает инфекции. В сомнительных случаях целесообразно провести повторный анализ спустя три – пять дней.

Исследование крови на наличие антител классов IgG, IgM, IgA к возбудителям инфекций  проводили не ранее 10–14 дня с момента заболевания, так как выработка антител иммунной системой начинается в этот срок.

Перед сдачей общего анализа крови последний прием пищи должен быть не ранее, чем за три часа до забора крови, так как после еды в крови повышается количество лейкоцитов. Лейкоциты являются показателем воспалительного процесса. На показатели красной крови (гемоглобин и эритроциты) прием пищи не влияет.

Необходимо отметить, что на сегодняшний день анализ мокроты используют очень редко, так как результаты посева мокроты не являются точными из-за загрязненности ее содержимым носоглотки и полости рта. Поэтому на практике в большинстве случаев возбудитель пневмонии остается не установленным [Маркина, 2006].

2.2 Методы исследования

Основными методами исследования являлись клинический и биохимический анализы крови. Производилось взятие крови у больных пневмонией для определения показателей необходимых  для установления диагноза. Клинический анализ крови проводился на гематологическом анализаторе Sysmex kx-21N. Он представляет собой полностью автоматизированную систему, не требует дополнительной пробоподготовки и работает в режиме цельной крови. После нажатия клавиши запуска анализатор автоматически отбирает, разбавляет и анализирует пробу цельной крови, выполняя измерения по 19 параметрам.

Для измерения количества эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов используется метод прямого абсолютного счета, который не требует калибровки.  

Определение уровня гемоглобина происходит с помощью модифицированного гемоглобинцианидного фотометрического метода, расчет производится по калибровочному графику.

Уровень показателя гематокрита определяется накопительным импульсным методом (по накоплению высоты эритроцитарного столба). Для расчета результатов используется калибровочный график.

В анализатор встроена специальная программа  для контроля среднего значения и контроля по Левей-Дженнингсу.

Биохимический анализ крови проводился на автоматическом селективном биохимическом анализаторе Conelab-20. Он рассчитан на выполнение фотометрических, турбидиметрических, потенциометрических тестов. Открытая реагентная система позволяет гибко программировать и хранить в памяти анализатора до 500 различных методик.  С помощью Conelab-20 определяют показатели в крови субстратов, ферментов, специальных белков, микроэлементов, электролитов. Для расчета результатов используют калибровочные графики [Камышников, 2001].

2.2.1 Клинический анализ крови

Клинический анализ крови – анализ, позволяющий оценить содержание гемоглобина в системе красной крови, количество эритроцитов, количество лейкоцитов и тромбоцитов. Также в него входят лейкоцитарная формула и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). С его помощью можно выявить анемии, воспалительные процессы, состояние сосудистой стенки и многие другие заболевания.

Общий анализ крови помогает определить тяжесть и фазу процесса пневмонии. Выделяют следующие изменения показателей в общем анализе крови при пневмонии:

- при легком течении пневмонии в анализе крови умеренный лейкоцитоз и сдвиг лейкоцитарной формулы влево, повышена СОЭ;

- при средней тяжести – выраженный лейкоцитоз со сдвигом влево до юных форм, повышена СОЭ;

- при тяжелом течении в анализе высокий лейкоцитоз, токсическая зернистость нейтрофилов, резкий сдвиг лейкоцитарной формулы влево вплоть до миелоцитов, снижение числа эозинофилов, лимфоцитов, очень высокая СОЭ. В крови также возможна анемия при длительной интоксикации; увеличение количества эозинофилов более 5 % является ранним и характерным признаком аллергизации и аллергии.

- при благоприятном течении пневмонии в анализе крови перед кризом нарастает количество эозинофилов и моноцитов;

- отсутствие лейкоцитоза при анализе крови наблюдается у ослабленных и пожилых больных и является прогностически неблагоприятным признаком  [ Метельский,  Бова, 2005].

Скорость оседания  эритроцитов определяют с помощью метода Панченкова. Принцип метода заключается в том, что в пробирке с кровью стабилизированной цитратом натрия, эритроциты оседают с различной скоростью в зависимости от физико-химических свойств крови. Выражается данная величина в мм/ч. В норме СОЭ составляет 0–19мм/ч [Царев, 2005]. (Таблица 1 – Нормы показателей общего анализа крови).  

Концентрацию гемоглобина определяют модифицированным гемоглобинцианидным  методом.  Принцип метода: гемоглобин крови при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином гемиглобинцианид (цианметгемоглобин), интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации гемоглобина в крови и измеряется фотометрически при длине волны 540 (500–560) нм. Норма составляет: 120–174 г/л. (таблица 1).

Таблица 1 – Нормы показателей общего анализа крови [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html]

Показатель

Референтное значение

1

Гемоглобин

120-174г/л

2

Эритроциты

4-5,5 10^12/л

3

Лейкоциты

5-10 10^9/л

4

СОЭ

0-19 мм/г

5

Гематокрит

36-52%

6

Эозинофилы

2-5%

7

Палочкоядерные нейтрофилы

2-8%

8

Сегментоядерные нейтрофилы

37-75%

9

Лимфоциты

19-45%

10

Моноциты

2-10%

Подсчет эритроцитов проводится в счетной камере. Принцип метода заключается в подсчете эритроцитов под микроскопом  в определенном количестве квадратов счетной сетки с последующим пересчетом на 1 мкл крови, исходя из объёма квадратов и разведения крови. Определение количества лейкоцитов проводят после лизирования эритроцитов в 100  больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2–4 ч. после взятия крови.  

Лейкоциты в зависимости от плотности распределяются в мазках неравномерно: нейтрофилы, базофилы, эозинофилы – по периферии, ближе к краям; моноциты, лимфоциты – ближе к середине. При подсчёте лейкоцитов используют методы Шиллинга или Филиппченко. По Шиллингу определяют количество лейкоцитов в четырёх участках мазка (четырёхпольный метод). Всего в мазке подсчитывают 100 – 200 клеток. Метод Филиппченко состоит в том, что мазок мысленно делят на три части: начальную, среднюю и конечную (трёхпольный метод). Подсчёт ведут по прямой линии поперёк мазка от одного его края к другому. В каждой части подсчитывают одинаковое количество клеток. Всего учитывают 100 – 200 лейкоцитов. Обнаруженные клетки записывают в специальную таблицу дифференциального подсчёта (сетка Егорова) [Луговская,  2002].

2.2.2 Биохимический анализ крови

Серомукоиды:  фракция углеводно – белковых комплексов, состоит из восьми индивидуальных белков, относящихся к белкам «острой фазы». Методы определения серомукоида основаны на осаждении белков сыворотки крови 1,8 М раствором перхлорной кислоты (HCIO4), выделения серомукоида из фильтрата с помощью фосфорно-вольфрамовой кислоты и последующем количественном определении его по одному из компонентов: белку, гексозам или тирозину. В норме содержание серомукоидов составляет 0,22 – 0,28 г/л. (таблица  2). У больных с пневмонией количество серомукоидов в крови возрастает до 1г/л [Камышников, 2009].

Так же белком «острой фазы» является СРБ, он способен очень быстро реагировать на появившийся воспалительный процесс, в норме СРБ не превышает 5 мг/л [Сидельникова, 2006]. (Таблица 2).

Таблица 2 – Нормы показателей биохимического анализа крови [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html]

Показатель

Референтное значение

1

СРБ

0-5 мг/л

2

Ревматоидный фактор

0-8 Ме/л

3

Серомукоид

0,22-0,28 г/л

4

ЛДГ

200-450 Ед/л

5

Фибриноген

2-4 г/л

Одной из методик определения  фибриногена является хронометрический метод по Клауссу; Определяется время свертывания разбавленной цитратной плазмы избытком тромбина. Время свертывания при этом пропорционально концентрации фибриногена, которую определяют по калибровочному графику.

Для определения общей активности ЛДГ в сыворотке крови используют две группы методов:

  1.  Спектрофотометрические, основанные на прямом оптическом тесте  Варбурга: различия в разности поглощения окисленной и восстановленной форм НАД.
  2.  Калориметрические:
  •  Динитрофенилгидразиновые, базирующиеся на исследовании содержания пирувата с помощью 2,4 – динитрофенилгидразина; из методов этой группы наиболее точным и чувствительным является метод Нательсона, состоящий в определении концентрации непрориагировавшего в реакции пирувата. Однако вследствие нестабильности раствора пировиноградной кислоты метод не получил широкого распространения. Метод Севела и Товарена, заключающийся в определении количества образовавшегося пирувата.
  •  Редоксиндикаторные методы – точны и просты технически, в них используется способность некоторых веществ (индикаторов) менять цвет в реакциях окисления-востановления. Для определения изоферментов лактатдегидрогеназы наиболее распространено электрофоретическое разделение на ацетате целлюлозы и агарозе. [http://biokhimiya/ru/enzymes/lactatdg.html]

  1.  Иммунологические исследования

В ходе проведения иммунологического анализа крови комплексно оцениваются защитные функции организма. Оценивается количество и функция иммунных клеток крови, присутствие тех или иных антител. Иммунный статус  — это комплексный показатель состояния иммунной системы, это количественная и качественная характеристика состояния функциональной активности органов иммунной системы и некоторых неспецифических механизмов противомикробной защиты.

Существуют скрининговые тесты оценки иммунного статуса, которые позволяют быстро оценить основные показатели работы иммунной системы. Стандартный скрининговый тест включает:
          - Подсчет абсолютного количества лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и тромбоцитов.
          - Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов различных классов (IgG, IgA и IgM).
          - Определение гемолитической активности системы комплемента CH50.
          - Проведение кожных тестов гиперчувствительности замедленного типа.

Количественное определение сывороточных иммуноглобулинов — один из основных тестов в оценке гуморального звена иммунитета. Концентрация сывороточных иммуноглобулинов отражает функциональное состояние клеточного звена иммунитета.

Таблица 3 – Основные показатели иммунного статуса [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html]

показатель

Содержание, мг/дл

Показатель

Содержание, %

IgM

40-230

CD3+ (Т-лимфоциты)

48-80

IgG

700-1600

CD4+ (Т-хелперы)

33-58

IgA

70-400

CD8+ (цитотоксические Т-лимфоциты)

11-36

С-3 комплемент

90-180

CD16+ (NK-клетки)

8-19

С-4 комплемент

10-40

CD19+ (В-лимфоциты)

5-10

Определение содержания иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM) по Манчини. Исследуемую сыворотку помещают в лунки агарового геля, который содержит антитела к иммуноглобулинам одного из классов IgG, IgA или IgM в известной концентрации. Иммуноглобулины, диффундирующие из лунок в агар, при взаимодействии с соответствующими антителами образуют кольца преципитации, размер которых прямо пропорционален содержанию иммуноглобулина. Референтные значения приведены в таблице 3.

Более детальное изучение иммунного статуса включает изучение количества и функциональной активности клеточного и гуморального звеньев иммунной системы:

- Исследование фагоцитарной функции.

           - Исследование системы комплемента.
           - Исследование Т-системы иммунитета.
           - Исследование В-системы иммунитета. 

Такое более подробное исследование иммунного статуса проводится в несколько этапов. Вначале делают ориентировочные исследования для выявления значительных дефектов иммунной системы (1 уровень), а затем может понадобиться и более подробное изучение (2 уровень), основываясь на данных предыдущего исследования.  [Караулов А. В. 2002]

  1.  Статистическая обработка данных

Для статистической обработки  результатов определялись средняя арифметическая  величина  () к каждой группе, стандартная ошибка (±m) проводилась программой  Microsoft office Excel 2007. Показатель достоверности (Р), достоверность различий по критерию Стьюдента (t) для одноименных показателей подсчитывалась  на сайте: [http://www/psycho-ok.ru/ statistics/ student/]. В полученных данных  различия считались достоверными при  р ≤0,05.


3 Метаболические показатели при пневмониях

3.1 Изменение показателей белкового обмена при пневмонии

Клинико-биохимическое исследование было проведено 25 больными пневмонией в возрасте от 26 до 72 лет. Им были проведены общие анализы крови и биохимические анализы крови. Всем больным ставился диагноз: неуточненная пневмония, т. к. анализ мокроты на возбудителя пневмонии не проводился.

Из 25 обследованных больных у семи наблюдался лейкоцитоз,  и только у четырех наблюдалась лейкопения. Лейкопения обычно считается неблагоприятным признаком  и наблюдается у ослабленных и пожилых больных.

При подсчете лейкоцитарной формулы выяснилось, что у большинства больных наблюдается сдвиг лейкоцитарной формулы влево.

Таблица 4 – Клинические показатели крови у больных пневмонией

n

Гемоглобин , г/л

Эритроциты, 10^12/л

Лейкоциты, 10^9/л

СОЭ,  мм/ч

Гематокрит, %

Лейкоцитарная формула,  %

эозинофилы

палочкоядерные  нейтрофилы

сегментоядерные

нейтрофилы

Лимфоциты

моноциты

Больные пневмонией

25

129,24 ±16,87

4,39

±0,49

7,72

±2,73

28,08

±12,0

38,4

±4,74

2,32

±0,97

3,84

±2,15

60,24

±11,18

27,36

±10,03

6,36

±3,26

Контрольная группа

10

143,9

±12,92

4,65

±0,32

6,0

±0,62

12,0

±3,6

43,47

±4,21

2,9

±0,9

3,4

±1,08

53,5

±8,2

31,2

±6,4

4,7

±1,7

Достоверность различий

р <

0,01

р

0,01

р<

0,05

р <

0,05

р <

0,01

р

0,01

р

0,05

р <

0,05

р <

0,01

р <

0,05

Норма (литературные данные)

120 –

174

4 – 5,5

5 – 10

0 – 19

36 –

52

2 – 5

2 – 8

37 – 75

19 – 45

2 – 10

А также у семи – эозинопения и лимфопения, что может свидетельствовать о тяжелом течении пневмонии.

У большинства обследованных значительно повышена скорость оседания эритроцитов (СОЭ), которая при тяжелом течении болезни может достигать 30 – 48 мм/ч.

Гемоглобин и  эритроциты у большинства больных находились в норме, а у шести пациентов наблюдалась анемия, снижение гемоглобина до 83г/л и одновременное уменьшение количества эритроцитов до 2,81 10^12/л. А также у восьми наблюдалось снижение показателя гематокрита.

Всем больным помимо клинического анализа обязательно проводился биохимический  анализ. Из данных таблицы пяти можно увидеть признаки воспалительного процесса характеризующегося  повышением белков «острой фазы». У всех больных наблюдалось повышение уровня СРБ и уровня серомукоида.

Таблица 5 – Биохимические показатели крови у больных  пневмонией

n

СРБ,  мг/л

Ревмотоидный фактор, МЕ/л

Серомукоид,

г/л

ЛДГ,

Ед/л

Фибриноген,

г\л

Больные пневмонией

25

20,02

±11,85

38,20

±14,68

0,35

±0,14

396,28

±92,51

4,98

±1,25

Контрольная группа

10

2,57

±1,40

4,10

±1,78

0,26

±0,03

324,80

±57,44

2,89

±0,49

Достоверность различий

р<0,05

р<0,05

р≥0,05

р<0,05

р<0,05

Норма (литературные данные)

0 – 5

0 – 8

0,22 – 0,28

200 – 450

2 – 4

А также у семнадцати больных мы выявили повышение фибриногена.  При  пневмонии определение фибриногена необходимы повторные динамические исследования, которые лишь при таком подходе и их оценке приобретает диагностическое  значение.

У многих повышен показатель ревматоидного фактора, что может свидетельствовать о возрасте больных, т. к. у людей пожилого возраста часто наблюдается повышение ревматоидного фактора.

Отмечена зависимость между выраженностью воспалительного процесса в легких и гиперферментацией. Наиболее информативный показатель при пневмонии является ЛДГ. Из результатов исследования у восьми больных из 25 наблюдалось повышение ЛДГ, что может говорить о затяженности  болезни и выраженности воспалительного процесса.

3.2 Определение иммунного статуса

Иммунологическое исследование было проведено 20 больным   пневмонией проходящим стационарное лечение.  Им был проведен полный анализ иммунного статуса.

Из двадцати больных у восемнадцати наблюдается повышение показателя CD19 (B-лимфоциты), это говорит об активации реакции гуморального иммунитета, в конечном итоге происходящей в сыворотке крови, и обеспечивающейся В-лимфоцитами.  Распознав чужеродный агент, они дифференцируются в плазматические клетки, производящие антитела - сывороточные белки (иммуноглобулины). У пяти пациентов мы наблюдали значительное повышение Ig G и Ig M. Эти белки связываются с чужеродным агентом, блокируя его биологическую активность, и удаляют его из организма - это прямое действие иммуноглобулинов.

У семи обследованных больных наблюдается снижение показателя CD8 (Т-киллеры). Эти клетки  полностью лизируют чужеродные клетки, покрытые иммуноглобулинами (Ig G). Также иммуноглобулины, связываясь

с антигенами образуют иммунный комплекс, активирующий систему комплемента – набор из одиннадцати сывороточных белков.

Таблица 6 – Показатели иммунного статуса у больных пневмонией

n

Ig A, мг/дл

Ig M, мг/дл

Ig G, мг/дл

C3 компл., мг/дл

С4 компл., мг/дл

СD3, %

СD4, %

СD8, %

СD16, %

СD19, %

Больные пневмонией

20

203,2

±86,34

218,1

±91,43

1463,9

±427,

28

316,8

±54,24

57,63

±4,56

74,68

±4,51

39,37

±6,05

15,38

±7,68

10,56

±3,34

29,25

±7,82

Контрольная группа

10

181,3

±58,36

112,9

±41,88

1131,9 ± 136,

68

81,2

±17,44

26,6

±5,32

74,27

±4,97

38,56

±7,24

17,49

±4,11

12,01

±3,03

12,56

±2,56

Достоверность различий

р<

0,05

р <

0,05

р <

0,05

р<

0,05

р<

0,05

р

0,05

р

0,05

р <

0,01

р <

0,01

р <

0,05

Норма (литературные данные)

70 – 400

40 – 230

700 – 1600

90 – 180

10 – 40

48 – 80

33 –58

11 – 36

8 – 19

5 – 10

У половины больных мы выявили снижение показателя С3 комплемента. При тяжелых осложненных формах пневмоний  С3 длительно остается на низком уровне,  можно предположить, что у некоторых больных отсутствие нарастания С3 обусловлено недостаточной его продукцией в течение инфекционно-воспалительного процесса, что и является одной из причин, определяющих тяжесть пневмонии и развитие осложнений.


ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Данная исследовательская работа была проведена на базе ЛИС (лабораторно-информационная система) с 2011 по 2012 г. в клинико-диагностической  лаборатории Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Специализированной клинической инфекционной больницы» (ГБУЗ «СКИБ».  Материалом исследования являлись сыворотка крови людей больных пневмонией. Клинико-биохимические исследования были проведены 25 больным возраста от 26 до 72 лет. В иммунологическом исследовании участвовали 20 больных находящихся на стационарном лечении.

Согласно данным клинического анализа можно отметить изменения показателей крови относительно нормы: повышение уровня  СОЭ в три раза, повышение количества лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. У семи больных наблюдалось снижение количества лейкоцитов, эозинопения, лимфопения, что говорит о тяжелом течении пневмонии. У шести была отмечена анемия, одновременное снижение гемоглобина и эритроцитов.

Из биохимических показателей  можно отметить увеличение показателя  СРБ до 40,3 мг/л, увеличение фибриногена до 7,7 г/л,  повышение уровня в два раза ЛДГ.

Иммунологическое исследование свидетельствует о тяжелом течении пневмонии и нарушении иммунного ответа. Иммунный ответ протекает в виде каскадной реакции. Сначала в клетках печени и косном мозге образуется В-лимфоциты не дифференцированные клетки. Почти у всех больных мы отметили их увеличение в три раза. Далее они производят  иммуноглобулины, у некоторых уже на данном этапе происходят нарушения, только у пяти больных было отмечено повышение Ig G, IgM. Затем иммуноглобулины связываются с системой комплемента. В нашем исследовании у большинства именно на этом этапе происходит сбой, у десяти больных мы отметили снижение С3 комплемента, он синтезируется в недостаточном количестве, что является одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.

В результате работы были сделаны следующие выводы:

  1.  Среди показателей клинического анализа можно отметить: повышение СОЭ в три раза, повышение уровня лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево.  У семи больных с тяжелым течением пневмонии наблюдалось снижение уровня лейкоцитов, а так же эозинопения, лимфопения. У шести больных была отмечена анемия, при одновременном снижение уровня гемоглобина и уровня эритроцитов.
  2.  Из биохимических показателей  можно отметить увеличение уровня СРБ до 40,3 мг/л, увеличение уровня фибриногена до 7,7 г/л,  повышение в два раза активности ЛДГ.
  3.  Среди иммунологических показателей отмечено  увеличение количества В-лимфоцитов в три раза. У пяти больных было отмечено повышение уровня Ig G, IgM. У десяти больных  отмечено снижение  уровня С3 комплемента, что может быть одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.


БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

Блюменталь И.Я. Пневмония, связанная с оказанием медицинской помощи, и внебольничная пневмония: сравнительная характеристика, оптимизация лечения // Вестник современной клинической медицины. Казань, Медицина. 2011. Т. 4, № 1. С. 52 –55.

Григорьев А. В., Гуркин Ю. А., Добрянков И. В. Справочник болезней. М., 2002. 576 с.

Заболеваемость населения России в 2010 году: Статистические материалы.  Часть III. М., 2011.  С. 94 – 98.  [Электронный ресурс]. – URL:http//www. mednet.ru

Замотаев И. П.  Острые пневмонии:  болезни органов дыхания / Под. ред.  Н.Г.  Палеева. М.,  Медицина. 1989. Т.2. С. 17 –102.

Зубков М. Н., Зубков М. М. Госпитальные пневмонии: этиология, патогенез, диагностика, профилактика и лечение // Consilium Medicum, М., 2000. Том 2, №1. С. 17–22.

Камышников В. С.  Техника лабораторных работ.  Минск, Белорусская наука.  2001.  286с.

Камышников В. С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям  и  лабораторной диагностике.  М.,  медпресс-информ. 2009.  896с.

Караулов А.В.   Клиническая иммунология и аллергология.  М., МИА.  2002.  651с.

Ковалева Л.И., Кулаков Ю.В. Актуальность термина «вторичная пневмония» в современной классификации // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. М.,  2004. № 16. С.  47 –51.

Кочегарова Е.Ю., Колосов В.П. Прогнозирование течения внебольничной пневмонии // Бюллетень физиологии и патологии дыхания.  М.,  2010. № 37. С. 4246.

Луговская, С.А. Лабораторная гематология. М.,  2002.  114 с.

Мавродий В.М. Пульмонология: глобальный альянс. Донецк,  2009. 80с.

Маркина М. В. Общеклинические анализы крови, мочи, их показатели, референтные значения, изменение параметров при патологии.  Новосибирск,  2006. 115с.

Метельский С. М.,  Бова А. А. Внебольничная пневмония // Медицинские новости.  Минск, УП ЮПОКОМ. 2005. №6. С. 23 – 35.

Молчанов Н.С. и Ставская В.В. Клиника и лечение острых пневмоний. М., Медицина. 1971. 295с.

Никонова Е.В.,  Чучалин А.Г.,  Черняев А.Л. Пневмонии,  эпидемиология,  классификация,  клинико-диагностические аспекты // Русский мед. Журнал. М., 1998. Т.5,  №17. С. 1095–1099.

Новожилова О. С. Биохимические показатели крови при бронхолегочных заболеваниях: Автореф.дис. канд.биол.наук. Уфа:  2007. 23с.

Нормы медицинских показателей [Электронный ресурс]. – URL: http//www.pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html

Острая пневмония, медицинский портал [Электронный ресурс], 2009–2011, http:// med@cureplant.ru

Приходько В. С.  Справочник по детской пульмонологии.  Киев, 1987.  538с.

Ронин В.С., Старобинец Г.М.   Руководство к практическим занятиям по методам клинических  лабораторных исследований / Учеб. Пособие.  4-е изд.- перераб. И доп. М., Медицина. 1989. 320с.

Сидельникова В. И., Лифшец В. М. Биохимические анализы в клинике. М.,  2006. 210с.

Сильвестров В.П., Федотов П.И. Пневмония. М., Медицина. 1987. 245с.

Синопальников А. И., Чучалин А. Г.   Внебольничная пневмония у взрослых:  практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике.  М.,  2010.  106c.

Ткачук В.А. Клиническая биохимия. / 2е изд., испр. и доп.  М., Гэотар-Мед.  2004.  512с.

 Уэст  Дж.   Физиология дыхания  / под редакцией д-ра биол. наук А. М. Генина.  М., Мир. 1988. С. 53 – 56. 

Царев В. П. Клиническая лабораторная диагностика. Минск, Высшая школа. 2005. 158с.

Лактатдегидрогеназа: Биохимия для студента [Электронный ресурс]. – URL:http://biokhimiya/ru/enzymes/ lactatdg.html


 

А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать

53196. Гра – тренінг «Обираємо професію разом» 41.5 KB
  Учитель: одна мудра людина сказала: Щастяце коли хочеться іти на працю а у вечорі йти додому Просто правда Але тільки на перший погляд. проводила тест на визначення профорієнтації за результатами цього тесту ви об’єднались в групи: 1 людина людина; 2 людина – техніка; 3 людина – природа; 4 людиназнакова система; 5 людина мистецтво. Завдання 1: на столі знаходяться речі дивлячись на них ви повинні відповісти на такі запитання: людина – людина: 1. Яка ємкість одноразового стаканчика людина техніка: 1.
53197. Мандрівка в народну гру 66 KB
  Їх із задоволенням грають діти і навіть дорослі не проти пограти. Проте у всіх іграх є одна спільна рисанародна мудрість. Гра найважливіша форма дитячої діяльності. Спостережливість уміння володіти собою як гра.
53198. Від навчання до бізнесу 41.5 KB
  Де знаходиться статуя Свободи Париж столиця якої країни Як називається вежа що похилилася але не падає Які іноземні фірми спортивного одягу ви знаєте Техніка якої країни славиться на весь світ Москва столиця якої країни У якому місті знаходиться Ейфелева вежа Священною твариною якої країни є корова На прапорі якої країни є кленовий листок Де знаходиться піраміда Тутанхамона Як називаються всі кістки людини В який телепередачі по Т.К Інтер учні заробляють гроші своїм розумом Як називається каркас...
53200. Игра «Счастливый случай» 51.5 KB
  Как называется самая глубокая часть океана Существует ли море без берегов Где оно расположено На каком материке ветер дует круглый год только на север Где находится самый длинный коралловый риф Назовите цветные моря. Где они находятся Какое озеро самое глубокое в мире Как называются сухие русла рек в Африке Что такое атолл Назовите самый крупный остров у берегов Африки Назовите пролив между Южной Америкой и Антарктидой. На какой реке находится водопад Виктория Как называется ветер меняющий направление два...
53201. Урок-гра «Пригадаємо цікаві сторінки математики» 120 KB
  Кожен конкурс оцінюється в пять балів. Перший конкурс Назви себе. Виставлення балів за конкурс. Другий конкурс Теоретичний.
53202. Ігровий майданчик на уроках англійської мови у початкових класах 233.5 KB
  На уроках англійської мови найчастіше проводяться мовні ігри фонетичні лексичні граматичні орфографічні алфавітні та комунікативні діалогічні монологічні аудитивні. Фонетичні ігри на уроках англійської мови у початкових класах На початковому етапі вивчення англійської мови велика увага приділяється правильній вимові звуків. Навчальна мета гри полягає в тому щоб діти вимовляли й дізнавалися необхідні звуки не думаючи про цьому спеціально роблячи це автоматично. Тому на уроках доцільно використати наступні фонетичні ігри.
53203. Розвиток обдарованості ігровими методами 477 KB
  Кожній групі даються вислови значення яких учасники мають пояснити: світла голова І група не пером пишуть а розумом ІІ група. Виграє та група яка зуміє краще аргументувати свою позицію. Слід також систематизувати ці аналоги за групами відповідно до певної ознаки.
53204. Авторська розробка дидактичної інтерактивної гри Ді-джей 220 KB
  У процесі гри дитина будь-якого віку перебуває в особливому емоційному стані який уявляє собою очікування та сам процес задоволення від розумової активності що виявляється у вільній творчій атмосфері гри гумору чи змагання. Але дуже важливо щоб форма зміст навчальної гри не був відірваний від сьогодення. Але чи зацікавить сучасного учня або студента таке заняття Я вважаю що актуальність методики навчальної гри та сучасна форма її подачі повинні бути одним з головних принципів при розробці та впровадженні ігрових методик у...